外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內吞入靶細胞,或直接將內容物釋放到靶細胞內,從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發(fā)生膜融合,導致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應,。通過介導細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內陳舊分子,、呈遞抗原、分化調節(jié)性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應,而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質,、促進中流轉移過程中的血管生長和中流細胞遷移,?;顑鹊耐饷隗w動態(tài)(哪個外泌體遷移至何處)也會成為今后需要努力研究的重要課題。外周血提取試劑盒
外泌體的提取方法:超速離心法,,這是外泌體提取比較常用的方法,。超速離心法得到的外泌的體量比較多,但是純度不足,,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體,。過濾離心法,,這種操作簡單、省時,,不會影響外泌體的生物活性,,但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法,,用此種方法分離到的外泌體純度高,,但是前期的準備工作繁雜,比較耗時,,量少,。外泌體的品牌有哪些在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩(wěn)定保存,。
瘤轉移是病癥致死的首要原因,。長久以來,對瘤轉移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用,。然而在近年來,,由于外泌體被發(fā)現(xiàn)可以作為包括瘤在內細胞之間信息傳遞的一種新方式,瘤轉移研究領域再度變得火熱起來。我所(瘤轉移的預警和預防研究所)以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉移與外泌體之間的聯(lián)系,,已取得一系列成果,。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中,。
外泌體的檢測,在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達,表達水平可100%反應瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達往往預示著寬泛浸潤與復發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉移性十二指腸病細胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細胞不能耐受PABP在胞內的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉移性十二指腸病細胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉移性十二指腸病的分子標志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉移性十二指腸病的治理提供了新的思路。隨著外泌體的功能逐漸被發(fā)現(xiàn),,近年來,,應用這些功能的醫(yī)治法也在被開發(fā)出來。
外泌體本身的惰性相當高,,但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能,,因此,外泌體是納米藥物遞送或基因治理的潛在載體,。外泌體作為功能性小RNA和蛋白質的天然載體也引起了藥物遞送領域的極大興趣,,因為它可以利用這些囊泡治理性遞送各種核糖核酸分子、肽和合成藥物,。外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術突破,,要將其用于臨床治理,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產還面臨很大的挑戰(zhàn),。首先,,對外泌體的具體合成機制、功能了解并不是非常詳細,。其次,,現(xiàn)在缺乏經濟有效的外泌體分離技術。外泌體的復雜性,,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口,。干細胞提取試劑盒應用
利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸?shù)侥繕思毎小M庵苎崛≡噭┖?/p>
雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢,,但在臨床應用上仍有一些限制:外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法,,但這種方法費時費力且提取效率較低,難以進行臨床推廣和應用,;而商業(yè)化的試劑盒質量參差不齊,,往往導致提取物雜質過多,且其售價較高,。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量,,蛋白濃度定量,,亦或是核酸濃度定量,目前仍存有爭議,。由于傳統(tǒng)的內參并不適用于外泌體,,在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段,。目前外泌體研究的整個流程中成本都很高,。外周血提取試劑盒