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外泌體本身的惰性相當(dāng)高,,但它們與細(xì)胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細(xì)胞并改變其生物學(xué)功能,因此,,外泌體是納米藥物遞送或基因治理的潛在載體,。外泌體作為功能性小RNA和蛋白質(zhì)的天然載體也引起了藥物遞送領(lǐng)域的極大興趣,因?yàn)樗梢岳眠@些囊泡治理性遞送各種核糖核酸分子、肽和合成藥物,。外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,,要將其用于臨床治理,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)還面臨很大的挑戰(zhàn),。首先,,對外泌體的具體合成機(jī)制、功能了解并不是非常詳細(xì),。其次,,現(xiàn)在缺乏經(jīng)濟(jì)有效的外泌體分離技術(shù)。外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原提呈,、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等方方面面,。腸道細(xì)菌外囊泡
Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹,,通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,10000xg離心1h,,可將直徑在30-150nm之間,,且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,,為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體,,將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,加入非線性蔗糖密度梯度層,,10000xg超速離心5h,,將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證,,確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層,。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒方法有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。
干細(xì)胞外泌體的六大內(nèi)在改善:細(xì)胞排毒:有效活化提高細(xì)胞能量加速細(xì)胞排毒,、淡化色斑,。細(xì)胞修復(fù):加速細(xì)胞修復(fù)、促進(jìn)微循環(huán)修復(fù),,修復(fù)痘坑痘印,。增加彈性:重塑彈力纖維膠原纖維網(wǎng)狀纖維,恢復(fù)肌膚彈性,,提亮皮膚,。淡化皺紋、細(xì)紋:促進(jìn)生成纖維細(xì)胞,,增強(qiáng)皮膚產(chǎn)生蛋白能力,,淡化皺紋,、頸紋等。減緩衰老:調(diào)節(jié)機(jī)體組織間物質(zhì)及信息傳遞速度,,加強(qiáng)修復(fù),,減緩衰老。營養(yǎng)供給:針對肌膚脆弱敏感日夜修復(fù),,面部,、眼周、肌底多效保護(hù),,不斷給皮膚補(bǔ)充充足的營養(yǎng),,喚醒肌膚細(xì)胞,有助于后續(xù)產(chǎn)品營養(yǎng)更好的吸收,。
外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的增殖過程,。瘤細(xì)胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖,而外泌體(Exosome)可以充當(dāng)這種信息載體,。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)基因突變時(shí),,外泌體(Exosome)會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細(xì)胞,從而導(dǎo)致原病基因的喚醒,、抗凋亡基因的表達(dá),,使瘤細(xì)胞獲得增殖特性。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細(xì)胞,,促進(jìn)瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視,為瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件,。然而,,雖然當(dāng)前外泌體生物學(xué)仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床轉(zhuǎn)化,。細(xì)胞表面受體表達(dá)不同,,外泌體對受體細(xì)胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,,也可能誘導(dǎo)凋亡或免疫調(diào)節(jié)等,。
為獲得外泌體的大小、濃度,、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,,可以通過電鏡、動態(tài)光散射,、納米顆粒跟蹤分析儀,、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法,、流式細(xì)胞儀等對外泌體進(jìn)行表征,。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異,。例如,,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形,,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致,。與之相反,,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會脫水變性,,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài),。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度,、粒徑分布等信息。在過去幾年中,,有幾個實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了各種細(xì)胞類型的外泌體分泌,,并討論了其潛在的生物學(xué)功能。杭州唾液外泌體
有報(bào)導(dǎo)指出,,外泌體內(nèi)miRNA參與促進(jìn)血管新生,、抗癥性和促進(jìn)膠原蛋白沉淀等一系列過程。腸道細(xì)菌外囊泡
雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性,、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,,因其富含組織相容復(fù)合物(MHC)及T細(xì)胞共刺激分子,,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖,;骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用,;γδT細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK),、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級別外泌體的細(xì)胞來源,。腸道細(xì)菌外囊泡