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外泌體分子標(biāo)志物

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-10-25

在Rameshwar等的研究中,,采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9,。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí),,發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不僅可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9,。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對(duì)中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,,顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力,。利用外泌體進(jìn)行GBM的zhiliao不只停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上,也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報(bào)道,。外泌體中含有豐富的蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)DNA以及RNA等,。外泌體分子標(biāo)志物

外泌體分子標(biāo)志物,外泌體提取試劑盒

小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng),,這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路,。另外,樹突狀細(xì)胞來源的外泌體也能夠通過激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng),,從而抑制中流,。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞,,從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能,。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì),在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用,。外泌體及其內(nèi)含物研究進(jìn)展各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá),,由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。

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人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,,進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。

由于卵巢中流細(xì)胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸(phosphati[1]dylserine,,PS)可以外泌體形式分泌入血,,惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對(duì)照者,因此外泌體中的PS可用于協(xié)助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷,。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點(diǎn)也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具,。血漿微囊泡EGFRvIIImRNA已被證明可作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者診斷的支持證據(jù)。2020年,,DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授團(tuán)隊(duì)合作,,通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個(gè)人類樣品中細(xì)胞外囊泡和顆粒(extracellularvesicleandparticle,,EVP)的蛋白質(zhì)組學(xué)特征,,鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白(特異度和靈敏度分別為95%和90%),并可區(qū)分患者的中流類型,,使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進(jìn)了一步,。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體。

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Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹,,通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,,10000xg離心1h,可將直徑在30-150nm之間,,且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來,。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體,,將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,,加入非線性蔗糖密度梯度層,10000xg超速離心5h,,將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀,。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證,確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層,。在細(xì)胞外基質(zhì)中,,外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切,碎片作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。江蘇CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體可以作為生物標(biāo)志物來對(duì)疾病進(jìn)行檢測(cè)。外泌體分子標(biāo)志物

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,,直徑約為30-200nm,,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(longnon-codingRNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度超過200nt,、不編碼蛋白的RNA,。近年來的研究表明lncRNA能在標(biāo)貫遺傳,、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控基因表達(dá),參與了X染色體沉默,、基因組印記以及染色質(zhì)修飾,、轉(zhuǎn)錄jihuo、轉(zhuǎn)錄干擾,、核內(nèi)運(yùn)輸?shù)榷喾N重要的調(diào)控過程,與人類疾病的發(fā)生,、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系,。lncRNA芯片對(duì)lncRNA進(jìn)行功能研究也被更多的關(guān)注,通過設(shè)計(jì)不同的lncRNA探針,,可以更加快速,、高通量地篩選出疾病或特定生物學(xué)過程中差異表達(dá)的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點(diǎn)深入分析調(diào)控機(jī)制,。外泌體分子標(biāo)志物

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