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來源: 發(fā)布時間:2023-11-06

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應(yīng)用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測量,,但兩種方法也各有不足。動態(tài)光散射法中散射光強度依賴于顆粒質(zhì)量(體積),,混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結(jié)果,,因此動態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動態(tài)光散射法所得的結(jié)果強烈依賴于所應(yīng)用的數(shù)學(xué)算法,。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時,,為了得到準確的濃度和粒徑信息,需要根據(jù)所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準,,操作繁瑣,。受檢測靈敏度所限,納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm~1μm的顆粒,,粒徑小于50nm的外泌體無法檢測,。除此之外,兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析,,難以區(qū)分合成的納米材料,、大蛋白質(zhì)聚合體和生物囊泡。不同類別的外泌體囊泡有三個征:表面具涂層的膜泡,、內(nèi)含纖維的膜泡,、電子致密囊泡。asce 外泌體

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外泌體的檢測,在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達,表達水平可100%反應(yīng)瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達往往預(yù)示著寬泛浸潤與復(fù)發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性十二指腸病細胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細胞不能耐受PABP在胞內(nèi)的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉(zhuǎn)移性十二指腸病細胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉(zhuǎn)移性十二指腸病的分子標志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉(zhuǎn)移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉(zhuǎn)移性十二指腸病的治理提供了新的思路,。唾液外泌體提取試劑盒公司有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上,。

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外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細胞的增殖過程。瘤細胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進瘤細胞的增殖,,而外泌體(Exosome)可以充當這種信息載體,。當細胞中出現(xiàn)基因突變時,,外泌體(Exosome)會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細胞,,從而導(dǎo)致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達,,使瘤細胞獲得增殖特性,。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細胞,,促進瘤細胞逃避免疫監(jiān)視,為瘤細胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件,。然而,,雖然當前外泌體生物學(xué)仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進展和臨床轉(zhuǎn)化,。

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志,,而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負載的治理物質(zhì)包括小分子化合物,、蛋白質(zhì),、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力,。外泌體獨特的生物兼容性,、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來瘤治理中有很大的利用價值,。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物,、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等,。作為小分子化合物載體,,外泌體裝載姜黃素、紫杉醇,、阿霉素等主要是用于抗瘤研究,;已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),例如酶,,細胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì),;外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,,siRNA)到靶細胞中,,從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾。外泌體研究相對困難,,需要盡快開發(fā)操作簡單,、可提取高純度外泌體的技術(shù)。

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微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺,這些方法包括免疫親和分離,、膜過濾,、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側(cè)向位移分選等,。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡(luò)組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質(zhì)樣品;且根據(jù)特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調(diào)流體運動,。微流控技術(shù)能夠以極高的準確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實驗室過程,取代昂貴的設(shè)備,基于微流控技術(shù)的電化學(xué)外泌體檢測芯片已經(jīng)受到廣fan關(guān)注。超速離心是從生物體液或細胞上清分離外泌體的金標準方法,。唾液外泌體提取試劑盒公司

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,。asce 外泌體

外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比,,病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體,。(2)由于特殊的生成方式,,外泌體的組成不同于來源細胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源,、結(jié)構(gòu)和運輸方式,,有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液,、尿液等體液,,囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶,、核酸酶等干擾,,有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測,。asce 外泌體