雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢(shì),，但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,，尚有許多問(wèn)題需解決：選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體：如DCs來(lái)源的外泌體可用于免疫治理，因其富含組織相容復(fù)合物（MHC）及T細(xì)胞共刺激分子,，能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,，進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖；骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）來(lái)源的外泌體對(duì)KRAS基因有抑制作用,；γδT細(xì)胞,、自然殺傷細(xì)胞（NK）、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級(jí)別外泌體的細(xì)胞來(lái)源,。外泌體被工程化改造后,，具有靶向特定細(xì)胞類型或組織的功能。組織外泌體提取試劑盒成分

外泌體的提取方法：免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不寬泛,。組織外泌體提取試劑盒步驟外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體,。

外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進(jìn)入受體細(xì)胞后仍具有翻譯蛋白質(zhì),、促進(jìn)病毒感ran等功能。據(jù)估計(jì),，單個(gè)外泌體含有約≤100拷貝數(shù)的蛋白質(zhì)和≤10000拷貝數(shù)的核苷酸,。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體中既包含與細(xì)胞形成、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的共有成分,，也包含與來(lái)源細(xì)胞的生物功能相關(guān)的特異分子,。如B淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞,、肥大細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有大量的主要組織相容性復(fù)合體蛋白質(zhì)MHCclassⅡ和MHCclassⅠ,，血小板和T細(xì)胞來(lái)源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質(zhì),，而ai細(xì)胞來(lái)源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質(zhì)分子,。這類特異分子在外泌體介導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、參與生理病理過(guò)程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用,。

與PC-3細(xì)胞相比,，PC-3細(xì)胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂,、膽固醇和磷脂酰絲氨酸,。外泌體常見(jiàn)的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63,、CD9、CD81),、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2),、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,，而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來(lái)源細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關(guān)，包含例如熱休克蛋白(HSP70,、HSP90)和細(xì)胞骨架蛋白(actin,、tubulin、cofilin)等,。除此之外,，外泌體中還攜帶有來(lái)源細(xì)胞的miRNAs、mRNAs,、non-codingRNAs,、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性,。細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡,。

利用蛋白質(zhì)免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可以對(duì)外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一,，操作時(shí)往往需要細(xì)胞裂解液作為陰性對(duì)照,。常用的外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白質(zhì)CD63、CD81,、CD9,、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,，尿液中)和凋亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白(Alix)等,，內(nèi)參蛋白質(zhì)可以是肌動(dòng)蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶，陰性對(duì)照蛋白可以是阻抑素(PHB,，線粒體標(biāo)志蛋白)或鈣聯(lián)結(jié)蛋白Calnexin,。在酶聯(lián)免疫吸附析法中，外泌體裂解液通過(guò)固載有抗體的固相基質(zhì),，隨后與檢測(cè)抗體共孵育,。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)的問(wèn)題,，相比較而言,，酶聯(lián)免疫吸附分析法比蛋白質(zhì)免疫印跡法更加快速，適用于高通量分析,。超速離心是從生物體液或細(xì)胞上清分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法,。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒原理

從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體,，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。組織外泌體提取試劑盒成分

妊娠期間胎盤(pán)可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié),、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤(pán)屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用,。而很多妊娠并發(fā)癥,，如子癇前期等胎盤(pán)功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤(pán)來(lái)源外泌體異常密切相關(guān),。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心,、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀,、免疫磁珠分選,、色譜法、過(guò)濾離心等方法,。其中,，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái),，然而妊娠期母血清中除含有胎盤(pán)組織釋放的外泌體,，還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體，如樹(shù)突狀細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞等,，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會(huì)影響胎盤(pán)來(lái)源外泌體的分離純化,。組織外泌體提取試劑盒成分