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北京外泌體蛋白質(zhì)組學

來源: 發(fā)布時間:2023-12-09

為獲得外泌體的大小,、濃度,、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過電鏡,、動態(tài)光散射,、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡,、酶聯(lián)免疫吸附法,、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,,在掃描電鏡,、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形,,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,,導致外泌體塌陷所致。與之相反,,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài),。另外,,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度,、粒徑分布等信息,。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。北京外泌體蛋白質(zhì)組學

北京外泌體蛋白質(zhì)組學,外泌體提取試劑盒

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),,現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。體液提取試劑盒生產(chǎn)廠家干細胞外泌體可以有效活化提高細胞能量加速細胞排毒,、淡化色斑。

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外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,,快速直達基底層起效,;富含100+多種胞外基質(zhì)蛋白、胞外基質(zhì)酶以及細胞黏附分子,;能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)中I型膠原蛋白,、成纖維蛋白,促進皮膚有效快速再生(Rejuvenation),;能夠有效促進皮膚成纖維細胞(HDFs)彈性蛋白生成,保持皮膚飽滿和彈性,;有效降低皮膚成纖維細胞(HDFs)中膠原蛋白酶(MMP-1)的生成從而防止皮膚間質(zhì)中IIIIII型膠原蛋白被降解,;富含活性物質(zhì)能夠促進皮膚有些血管的修復與重建再生。

在運輸DOX的研究中,,Wei等選擇了已經(jīng)在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞,,通過化學轉(zhuǎn)染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結(jié)合,,使外泌體對DOX的運輸具有靶向性,。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經(jīng)靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,,并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內(nèi),觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經(jīng)出現(xiàn)在中流組織處,,在注射2h后外泌體的含量高,,而未經(jīng)靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,幾乎很少到達中流組織處,,說明對iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性,。外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標記物。

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外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比,,病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異,。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式,,外泌體的組成不同于來源細胞,。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運輸方式,,有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制,。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液,,囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶,、磷酸酶、核酸酶等干擾,,有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,,通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,,同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解,。北京外泌體蛋白質(zhì)組學

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志,而且可作為天然的藥物傳遞載體,。北京外泌體蛋白質(zhì)組學

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,,其主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9),、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD63作為生物標記,,通過將CD63與熒光蛋白偶聯(lián),,帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續(xù)進行,、觀察內(nèi)化或其他實驗,。慢病毒載體的構(gòu)建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號、長末端重復序列)和編碼反式作用蛋白的序列進行分離。北京外泌體蛋白質(zhì)組學