二、生化及免疫學(xué)檢驗:1,、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L,。【臨床意義】(1)精液果糖為0,,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如,、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,,常見于精囊炎和雄***分泌不足,,果糖不足可導(dǎo)致精子運動能量缺乏,甚至不易受孕,。2,、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者,。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法,。3,、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),,其活力不足,,可導(dǎo)致男性不育。4,、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L,;LDH-X相對活性:≥0.426?!九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,,是精于運動獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標,。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,,精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低,。服用棉酚也可抑制此酶活性,。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn),嚴格按照使用指南進行操作?,。上海密度精子分析W.H.O 4
CASA,,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力,、濃度和形態(tài)進行精確評估的方法,。WHO第五版指南強調(diào),相比人工檢測,,CASA提供更準確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),,如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數(shù),。研究顯示,,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,,適用于精子動力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標本制備,、幀頻率,、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析,。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進行兩次分析,,每次至少200個精子,,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出,。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,,確保**完全液化并充分混勻,。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求,。對于高濃度**,,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,,CASA能夠定量評估精子頭部,、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估,。對于碎片過多或黏稠的**,,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,,如VCL(曲線速度),、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性,。香港精子分析負相差Hamilton Thorne精子分析儀具有快速,、高效、智能化的特點,,能夠滿足用戶對精子分析的多方面需求,。
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因,。(2)精子活動力:指精子活動狀態(tài),也是指活動精子的質(zhì)量,。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,,運動迅速,活潑有力,,直線向前運動,;②精子活動較好,運動速度尚可,,游動方向不定,,呈直線或非直線運動,帶有回旋,;③精子運動不良,,運動遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動,,向前運動能力差,;④死精子,,精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,,若>40%的精子活動不良(③,、④)級,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因,。精子活動力低,,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥,、雄***等所致。
精子分析儀是計算機技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內(nèi)精子的運行軌跡,,客觀記錄了精子的密度、活動力,、活動率和存活率等各項參數(shù),。
計算機輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng),、圖像采集系統(tǒng),、恒溫系統(tǒng)、計算機處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成,。此外,,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣 [1],。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成,。可以將標本信號通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接嬎銠C2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,,其功能是對CCD信號進行抓拍,、識別、預(yù)處理后,,將成熟信號輸送到計算機,。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),,提供穩(wěn)定,、可靠的檢查環(huán)境。4.計算機系統(tǒng):對圖像信號進行***系統(tǒng)的加工處理,,對獲得的數(shù)據(jù)進行輸出和存儲的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,,利用現(xiàn)代化的計算機識別技術(shù)和圖像處理技術(shù),,對精子的動靜態(tài)特征進行***的量化分析,,對精子的密度、活力,、活率,、運動軌跡等特征進行量的檢測分析 精子分析儀的出現(xiàn)簡化了檢驗流程,提高了診斷的可靠性,,對于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用,。
精子分析儀使用方法
儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同,,操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓(xùn),,了解工作原理、操作規(guī)程,、校正方法等,,使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟 [1]:開機接通電源,,打開計算機輔助**分析系統(tǒng),。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,,滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,,置顯微鏡操作平臺上,點擊“活動顯示”菜單,,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,,顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單,,系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài),,圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結(jié)束后,,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果,。 該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù),Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持,,確保用戶能夠充分利用設(shè)備的功能,。北京慢速運動精子分析W.H.O 4
精子分析儀能分析與精子運動功能相關(guān)的各種參數(shù)。上海密度精子分析W.H.O 4
CASA可將每個精子的活力按以下分級:(1)前向運動型(PR):精子運動活躍,、線性運動或者在較大的范圍內(nèi)運動,。(2)非前向運動型(NP):所有其他非前向運動的形式,如精子在較小的范圍內(nèi)運動,,精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動,。(3)完全不動型(IM):精子完全不動。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標準的術(shù)語。(1)VCL=曲線速度(mm/s),。精子頭沿其實際的曲線,,即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力,。(2)VSL=直線速度(mm/s),。根據(jù)精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s),。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度,。(4)ALH=精子頭側(cè)擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度,。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示,。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性,。即VSL/VCL,。(6)WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,。即VAP/VCL,。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性,。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz),。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率,。(9)MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均***值,。上海密度精子分析W.H.O 4