Piezo-ICSI程序:

使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤；按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,，輕輕將汞推至針尖處，在20-25℃室溫下,，準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作,。具體操作前，首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用,；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合,；再將單個(gè)精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾,；連續(xù)剪切5個(gè)精子后,，將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中，準(zhǔn)備將精子頭逐個(gè)注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中,。注射時(shí),，從時(shí)鐘9點(diǎn)的方向吸住卵母細(xì)胞，使紡錘體保持在6點(diǎn)或12點(diǎn)的位置,，從3點(diǎn)的方向輕輕進(jìn)針,，同時(shí)用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時(shí),，將精子頭吹至針尖處,，繼續(xù)進(jìn)針，直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,，幾乎貼近對(duì)側(cè)質(zhì)膜時(shí),，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜，將精子頭吐出,，回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,，輕輕退針，完成一次注射,。依次操作,，盡快實(shí)現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,，并且移入CO?箱培養(yǎng),。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射，在注射HCG后17 h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射,。 PMM高精度控制,，顯微注射針的移動(dòng)分辨率達(dá)到0.1um，可以精確穿透目標(biāo),，不會(huì)誤傷其他結(jié)構(gòu),。北京PMM 壓電ICSI

雖然Piezo-ICSI對(duì)于大齡試管準(zhǔn)媽媽們的***來說非常有意義，但這項(xiàng)技術(shù)的使用卻對(duì)生殖中心有著比較高的門檻,。日本英醫(yī)院擁有三臺(tái)Piezo-ICSI儀器,，儀器的顯微鏡來自日本精工企業(yè)，手動(dòng)精密操作臺(tái)來自德國(guó),。作為**精密儀器,，它的每一個(gè)組件成本都達(dá)百萬，整體造價(jià)超過千萬,。

使用Piezo-ICSI不單單是設(shè)備升級(jí),，對(duì)培養(yǎng)師的操作要求和難度也是直線升級(jí)的,。具體說來，因?yàn)槭芫僮魇窃诟弑讹@微鏡下利用操作桿來進(jìn)行的,，需要培養(yǎng)師同時(shí)配合操作觀察操作桿,、顯微鏡、受精針和顯示屏,。這么聽起來是不是感覺難度似乎還可以,？然而事實(shí)上，在操作的過程中,，培養(yǎng)師需要不斷的進(jìn)行距離判斷的「切換」：想象一下,，**挪動(dòng)1cm，鏡下實(shí)際只會(huì)挪動(dòng)0.1mm,，但出現(xiàn)在視野中的范圍,，實(shí)際上會(huì)有5cm那么大！ 美國(guó)透明帶打孔壓電單精注射通過使用壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI,，醫(yī)生可以更加準(zhǔn)確地選擇和捕捉精子,，提高受孕的幾率。

傳統(tǒng)的壓電陶瓷較其它類型的壓電材料壓電效應(yīng)要強(qiáng),，從而得到了廣泛應(yīng)用,。但作為大應(yīng)邊，高能換能材料,，傳統(tǒng)壓電陶瓷的壓電效應(yīng)仍不能滿足要求,。于是近幾年來，人們?yōu)榱搜芯砍鼍哂懈鼉?yōu)異壓電性的新壓電材料,，做了大量工作,，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)并研制出了Pb(A1/3B2/3)PbTiO3單晶（A=Zn2+,Mg2+）。這類單晶的d33比較高可達(dá)2600pc/N(壓電陶瓷d33比較大為850pc/N),k33可高達(dá)0.95（壓電陶瓷K33比較高達(dá)0.8）,，其應(yīng)變>1.7%,，幾乎比壓電陶瓷應(yīng)變高一個(gè)數(shù)量級(jí)。儲(chǔ)能密度高達(dá)130J/kg,，而壓電陶瓷儲(chǔ)能密度在10J/kg以內(nèi),。鐵電壓電學(xué)者們稱這類材料的出現(xiàn)是壓電材料發(fā)展的又一次飛躍。現(xiàn)在美國(guó),、日本,、俄羅斯和中國(guó)已開始進(jìn)行這類材料的生產(chǎn)工藝研究，它的批量生產(chǎn)的成功必將帶來壓電材料應(yīng)用的飛速發(fā)展,。

ICSI技術(shù)作為輔助受精的一種手段,，在近10年獲得長(zhǎng)足發(fā)展。ICSI技術(shù)在動(dòng)物受精機(jī)理研究、野生動(dòng)物遺傳資源保存,、拯救珍稀動(dòng)物和胚胎工廠化生產(chǎn)等方面有著非常廣闊的應(yīng)用前景,。該技術(shù)已經(jīng)成為人類臨床醫(yī)學(xué)上***男性不育癥的重要手段，并在全世界得到廣泛應(yīng)用,。

盡管ICSI已取得很大成就,，但是其存在的問題也不容忽視,。首先,，由于人為地選擇，動(dòng)物自身對(duì)精子優(yōu)勝劣汰的選擇遭到破壞,。這對(duì)動(dòng)物種群的發(fā)展產(chǎn)生的影響還需長(zhǎng)期深入的研究,。如果能詳細(xì)了解精子的表型和基因型之間的關(guān)系，相信ICSI技術(shù)的可靠性會(huì)有所明確,。其次,，作為胚胎生物技術(shù)的一部分。ICSI 技術(shù)也存在總體效率低的問題,，而且胚胎移植后妊娠率低而流產(chǎn)率高亦是目前存在的普遍問題,。另外，存在出生動(dòng)物的死亡和畸形等不良后果,。因此要更深入地研究其機(jī)理和操作等問題,，進(jìn)一步改善ICSI技術(shù)。比如Piezo-ICSI技術(shù)就可以有效提高成功率,。 PMM PIEZO具備良好的可擴(kuò)展性,，可以根據(jù)不同的需求進(jìn)行調(diào)整和升級(jí)，滿足不同醫(yī)療機(jī)構(gòu)的需求,。

如今壓電陶瓷已經(jīng)被科學(xué)家應(yīng)用到**建設(shè),、科學(xué)研究、工業(yè)生產(chǎn)以及和人民生活密切相關(guān)的許多領(lǐng)域中,，成為信息時(shí)代的多面手,。在航天領(lǐng)域，壓電陶瓷制作的壓電陀螺,，是在太空中飛行的航天器,、人造衛(wèi)星的“舵”。依靠“舵”,，航天器和人造衛(wèi)星,，才能保證其既定的方位和航線。傳統(tǒng)的機(jī)械陀螺,，壽命短,，精度差，靈敏度也低,，不能很好滿足航天器和衛(wèi)星系統(tǒng)的要求,。而小巧玲瓏的壓電陀螺靈敏度高,，可靠性好。在潛入深海的潛艇上,，都裝有人稱水下偵察兵的聲納系統(tǒng),。它是水下導(dǎo)航、通訊,、偵察敵艦,、清掃敵布水雷的不可缺少的設(shè)備，也是開發(fā)海洋資源的有力工具,，它可以探測(cè)魚群,、勘查海底地形地貌等。在這種聲納系統(tǒng)中,，有一雙明亮的“眼睛”——壓電陶瓷水聲換能器,。當(dāng)水聲換能器發(fā)射出的聲信號(hào)碰到一個(gè)目標(biāo)后就會(huì)產(chǎn)生反射信號(hào)，這個(gè)反射信號(hào)被另一個(gè)接收型水聲換能器所接收,，于是,，就發(fā)現(xiàn)了目標(biāo)。目前,，壓電陶瓷是制作水聲換能器的比較好材料之一,。日本PRIME TECH 從PMM 150FU到PMM 4G，再到新一代的PMM 6,。日本透明帶壓電

PMM通過將精子尾部與頭部割離,精子頭部吸入平口,在中低檔能量下即可穿透透明帶,進(jìn)行單精子顯微注射,。北京PMM 壓電ICSI

為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化？如下：一,、卵子成熟度不足,。卵子的成熟包括核成熟（以排出***極體為標(biāo)志）以及胞質(zhì)成熟，而胞質(zhì)成熟往往滯后于核成熟,，兩者并不完全同步,。有對(duì)照研究表明，脆性卵膜組的成熟卵細(xì)胞比例***低于正常破膜組,，ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組,，這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關(guān)性，并**終影響了卵子ICSI后是否存活,。二,、雌***水平。到目前為止,，關(guān)于雌***水平對(duì)脆性卵膜的影響,，現(xiàn)有的研究結(jié)論并不一致，但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性。三,、ICSI機(jī)械操作,。一方面ICSI是侵襲性操作，可能破壞卵膜,、細(xì)胞骨架等細(xì)胞器,，另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護(hù)作用，細(xì)胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解,。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化,，除了改善注射方式（如進(jìn)針前利用激光穿透或削薄透明帶，操作盡可能輕柔等）,，還可采用改進(jìn)的Piezo-ICSI（壓電脈沖破膜輔助ICSI）,，能有效改善注射后卵子退化的情況。此外,，在臨床促排卵方面，也可考慮調(diào)整藥物用量,，在保證卵泡大小均勻的情況下,，盡量推遲扳機(jī)時(shí)間，提高卵母細(xì)胞成熟度,，減輕ICSI后卵子退化的比例,，以盡可能保證ART***的效果。北京PMM 壓電ICSI