二,、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):5,、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L,?!九R床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,,其次是精囊,。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,,附睪中含高濃度的肉堿,,主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來源有關(guān)?,F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪,、精囊的功能,。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪,、精囊功能正常,。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,,則提示精囊功能障礙,,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,,果糖含量正常,,說明附睪功能障礙,精囊功能正常,;而肉堿急劇下降,,果糖含量亦減少,表示精囊,、附睪功能均發(fā)生障礙,。6、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性,?!九R床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,,可抑制精子的活動(dòng),,干擾精子的運(yùn)行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙,。即使已經(jīng)受精,,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn),。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷,、炎癥,、附睪等生殖系***時(shí),系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體,。?精子分析可以分析參數(shù)有,,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。山羊精子分析LIN
CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度,、對(duì)比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?,?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高,,檢測(cè)時(shí)應(yīng)多次試用,,尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測(cè)定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,,測(cè)定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],,這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,,如精原細(xì)胞,、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去,。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果,。3.4對(duì)于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,,再涂片檢查,,確認(rèn)無精后再出報(bào)告。 香港全自動(dòng)化精子分析VCL該設(shè)備還支持多種分析模式,,包括精子濃度,、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測(cè)量,,滿足用戶的多樣化需求,。
美國(guó)Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證,。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較,。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),。結(jié)論精子分析儀是一種方便,、可靠、快速,、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,。
ivos自動(dòng)精子分析系統(tǒng)
hamiltonthorne的casa系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室,、動(dòng)物繁殖基地,、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn),。可以應(yīng)用于包括人類,、公牛,、馬、,、狗,、兔子、老鼠,、綿羊,、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物,。全自動(dòng)的ivos可以提供快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出,。可以使用一次性的和可重復(fù)的載玻片,,深度從10um~100um,。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀,。**的軟件升級(jí),。ivos能提供:、客觀,、具有重復(fù)性的結(jié)果高速分析,,在60hz下半秒掃描30幀為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。高等級(jí)數(shù)據(jù)安全,。(順應(yīng)美國(guó)fda的操作軟件)數(shù)據(jù)結(jié)果包括:計(jì)數(shù),、濃度。運(yùn)動(dòng)以及前進(jìn)運(yùn)動(dòng)三種速度參數(shù)vap,,vsl和vcl,,外加運(yùn)動(dòng)參數(shù)lin,,alh,str和bcf,。內(nèi)置質(zhì)控保證分析精度可以回放精子活動(dòng),,標(biāo)記不同狀態(tài)精子。迅速根據(jù)新的設(shè)定對(duì)上次分析結(jié)果進(jìn)行重新計(jì)算,,此過程不會(huì)損失畫面,。形態(tài)可選附件:三維嚴(yán)謹(jǐn)形態(tài)(人類):的經(jīng)過認(rèn)證的嚴(yán)謹(jǐn)?shù)男螒B(tài)分析。用戶自定義形態(tài),。即時(shí)形態(tài)分析熒光可選附件:自定義熒光(只有ivos)可以用濾光片的casa系統(tǒng),。高精度的計(jì)數(shù)。同時(shí)在氙氣燈析運(yùn)動(dòng)和靜止,,使用各種熒光染色,,自動(dòng)探測(cè)計(jì)數(shù)染色細(xì)胞,自動(dòng)歸類,,可選彩色攝像頭,。 精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率,。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果,。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml,、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml,、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%,。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池,、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性,。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。精子分析儀因其高效,、J準(zhǔn)的特點(diǎn),,已經(jīng)在眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)中廣泛應(yīng)用,深受患者信賴,。上海計(jì)算機(jī)輔助精子分析頻閃光源
全自動(dòng)精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平,,廣泛應(yīng)用于泌尿科,男性科以及計(jì)劃生育,、優(yōu)生優(yōu)育研究等,。山羊精子分析LIN
精子分析儀工作原理
以灰度識(shí)別CASA為例,,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù),,通過顯微鏡放大后,,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī),。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度,、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù),對(duì)采集圖像進(jìn)行精子密度,、活動(dòng)力,、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析,,由計(jì)算機(jī)處理后,,打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對(duì)1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)分析,,2-3分鐘即可完成檢測(cè) [1],。
優(yōu)點(diǎn):
操作簡(jiǎn)便,用量少,,檢測(cè)速度快,,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè),并且能夠快速,、準(zhǔn)確的測(cè)定精子密度,、活力、精子分級(jí)等,,還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等,。
缺點(diǎn):
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,,不同的精子計(jì)數(shù)池的相對(duì)準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果,。 山羊精子分析LIN