前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的,、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù),。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素,；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系,。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論,。手冊重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,，強(qiáng)調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運(yùn)動的內(nèi)容,。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病,。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容,。CASA系統(tǒng)操作簡便，檢測速度快,，且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測。北京Hamilton Thorne精子分析

檢查具備條件

受檢者,，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）,； [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,，以**方式獲取精液,，一次全部射入容器,，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間,； 貼身保溫,，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間,。 精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽踊顒忧闆r,，精子密度（個/毫升）,，精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動精子（個/高倍視野）等,。見不動精子,，須染色方可區(qū)分：不活動的精子,、死精子,、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),，仍然找不到精子,；方可報(bào)告無精,。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。 人精子分析LIN所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?,。

精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù),。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量,。

將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘,，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù),，在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù),。例如計(jì)數(shù)為1280個,，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000,。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克,、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升,。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,，福爾馬林有使精子制動的作用,。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù),。如精子的數(shù)目極少,，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù),。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的,，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能,。

精液顯微鏡檢查

(1)精子存活率：排精后30～60分鐘,，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%,，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因,。(2)精子活動力：指精子活動狀態(tài),，也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級：①精子活動好,，運(yùn)動迅速,，活潑有力,，直線向前運(yùn)動；②精子活動較好，運(yùn)動速度尚可,，游動方向不定,，呈直線或非直線運(yùn)動,，帶有回旋,；③精子運(yùn)動不良,，運(yùn)動遲緩,，原地打轉(zhuǎn)或抖動，向前運(yùn)動能力差,；④死精子,，精子完全不活動,。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,，若＞40%的精子活動不良(③,、④)級,，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動力低,，主要見于精索靜脈曲張,、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致,。 不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大,，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義,。

Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析

根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評價(jià),從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動精子百分率,、總活力)進(jìn)行分析比對,。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關(guān)性;對實(shí)驗(yàn)儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求,。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度,、前向運(yùn)動精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測,。 傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,，準(zhǔn)確率有待提高。兔子精子分析DCL

IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點(diǎn),，能夠捕捉到微小的細(xì)節(jié)和變化,，進(jìn)一步提高了精子分析的準(zhǔn)確性。北京Hamilton Thorne精子分析

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,，常囑男方作精液檢查,，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者,，可呈淡黃色,，若出現(xiàn)鮮紅色. 暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷,。每次排精量為2~6毫升,，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,，否則視為異常,。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8,。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升,。排精后1小時(shí)內(nèi)活動精 ＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動,；1級：精子原地?cái)[動,；2級：有中等的前向運(yùn)動；3級：前向運(yùn)動活躍,，快速直線運(yùn)動,。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%,。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,，應(yīng)對精子數(shù)量 活力 活動率 液化時(shí)間 畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。 采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活,，并且不得有**、夢遺等情況,，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等,。北京Hamilton Thorne精子分析