方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76),、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml,、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%,。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池,、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性,。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。該設(shè)備還支持多種分析模式,,包括精子濃度,、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測量,,滿足用戶的多樣化需求,。南京馬精子分析VCL
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,,液化后呈半透明乳白色,,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統(tǒng)炎癥,、結(jié)核,、和**,黃色膿樣精液,見于精囊炎或前列腺炎,。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,,可能是精子數(shù)量減少,見于生殖系統(tǒng)炎癥,,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷,;如果精液1小時后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,,如前列腺炎,,精子不液化可以抑制精子活動力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值,。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動和代謝,,不利于受孕,。 北京馬精子分析DCLCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性,。
人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性,、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍,、冷凍精液的解凍,、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性,。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存,;對使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗程序;所有儲罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報警系統(tǒng),,以監(jiān)測溫度和液氮液位,,傳感器應(yīng)連接警報器,可通過實驗室人員的終端進行提醒,。新證據(jù)表明,,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,,可以防止冰晶的形成,,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,,也可以使用封閉系統(tǒng),,不需要無菌的液氮。
檢查具備條件
受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時間至少不得少于100小時),; [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,以**方式獲取精液,,一次全部射入容器,,蓋上蓋,記錄標(biāo)本離體時間,; 貼身保溫,,30分鐘內(nèi)送到化驗室,并向檢驗員提供標(biāo)本取出時間,。 精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽?,精子活動情況,精子密度(個/毫升),,精液液化時間(標(biāo)本取出到精液液化的時間),,不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,,須染色方可區(qū)分:不活動的精子,、死精子、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗,,仍然找不到精子;方可報告無精,。經(jīng)三次取樣化驗,,結(jié)果仍然找不到精子方可確認無精子癥。 在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,,精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié),。
精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,,滴于血細胞計數(shù)板上,,在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計數(shù)精子數(shù)量,。
將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,,用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,,振蕩三分鐘,,然后置于血球計數(shù)板內(nèi),計數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),,在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù),。例如計數(shù)為1280個,,則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克,、福爾馬林1毫升,、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,,福爾馬林有使精子制動的作用,。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),,稀釋后進行計數(shù),。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計數(shù),。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,,因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的,。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能,。 通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,,從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。美國前向運動精子分析VCL
Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,,用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用,。南京馬精子分析VCL
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因,。(2)精子活動力:指精子活動狀態(tài),也是指活動精子的質(zhì)量,。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,,運動迅速,活潑有力,,直線向前運動,;②精子活動較好,運動速度尚可,,游動方向不定,,呈直線或非直線運動,帶有回旋,;③精子運動不良,,運動遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動,,向前運動能力差,;④死精子,,精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,,若>40%的精子活動不良(③,、④)級,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因,。精子活動力低,,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥,、雄***等所致。 南京馬精子分析VCL