方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果,。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76),、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%,。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52),、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池,、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性,。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。該設(shè)備還支持多種分析模式,,包括精子濃度,、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測量,,滿足用戶的多樣化需求,。南京馬精子分析VCL
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml,。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黃色,。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統(tǒng)炎癥,、結(jié)核、和**,,黃色膿樣精液,,見于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化,。如果粘稠度降低呈米湯樣,可能是精子數(shù)量減少,,見于生殖系統(tǒng)炎癥,,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷;如果精液1小時(shí)后不液化,,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活動(dòng)力而影響受孕,。(4)酸堿度:pH值,。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的陰道分泌物,,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動(dòng)和代謝,,不利于受孕。 北京馬精子分析DCLCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù),,這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性,。
人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案,、快速液氮熏蒸冷凍,、冷凍精液的解凍,、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性,。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存,;對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序;所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng),,以監(jiān)測溫度和液氮液位,,傳感器應(yīng)連接警報(bào)器,可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒,。新證據(jù)表明,,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,,可以防止冰晶的形成,,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,,也可以使用封閉系統(tǒng),,不需要無菌的液氮。
檢查具備條件
受檢者,,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)); [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè),,以**方式獲取精液,,一次全部射入容器,蓋上蓋,,記錄標(biāo)本離體時(shí)間,; 貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室,,并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間,。 精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽踊顒?dòng)情況,,精子密度(個(gè)/毫升),,精液液化時(shí)間(標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間),不動(dòng)精子(個(gè)/高倍視野)等,。見不動(dòng)精子,,須染色方可區(qū)分:不活動(dòng)的精子、死精子,、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),仍然找不到精子,;方可報(bào)告無精,。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),,結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。 在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,,精子質(zhì)量的評(píng)估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié),。
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量,。
將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,,振蕩三分鐘,,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),,在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù),。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),,則每毫升精子應(yīng)為128,000,000,。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升,、蒸餾水加至100毫升,。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用,。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù),。如精子的數(shù)目極少,,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能,。 通過計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算,從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù),。美國前向運(yùn)動(dòng)精子分析VCL
Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,,用戶無需具備專業(yè)知識(shí)也能夠輕松上手使用。南京馬精子分析VCL
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因,。(2)精子活動(dòng)力:指精子活動(dòng)狀態(tài),也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量,。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí):①精子活動(dòng)好,,運(yùn)動(dòng)迅速,活潑有力,,直線向前運(yùn)動(dòng),;②精子活動(dòng)較好,運(yùn)動(dòng)速度尚可,,游動(dòng)方向不定,,呈直線或非直線運(yùn)動(dòng),帶有回旋,;③精子運(yùn)動(dòng)不良,,運(yùn)動(dòng)遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng),,向前運(yùn)動(dòng)能力差,;④死精子,精子完全不活動(dòng),。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上,,若>40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí),,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因,。精子活動(dòng)力低,主要見于精索靜脈曲張,、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致,。 南京馬精子分析VCL