在核移植過程中，紡錘體的穩(wěn)定性是首要考慮的問題,。冷凍和解凍過程中的溫度變化和冷凍保護劑的毒性都可能對紡錘體造成損傷,，導(dǎo)致染色體分離異常，進而影響胚胎發(fā)育,。因此,，如何在冷凍過程中保持紡錘體的穩(wěn)定性，是核移植紡錘體卵冷凍研究面臨的重要挑戰(zhàn),。體細胞核在移入去核卵母細胞后,，需要經(jīng)歷復(fù)雜的重新編程過程，以獲得全能性,。然而,，這一過程受到多種因素的調(diào)控，包括表觀遺傳修飾,、轉(zhuǎn)錄因子表達等,。在冷凍過程中，這些調(diào)控機制可能受到干擾,，導(dǎo)致重新編程失敗或異常,，從而影響胚胎發(fā)育。紡錘體微管的數(shù)量和分布隨細胞分裂階段而變化,。Hamilton Thorne紡錘體胚胎植入

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用我們知道,，成熟的卵母細胞含有1個極體,，也就是***極體。IVF加入精子后,，精子會穿透層層障礙**終進入卵子,，隨著時間的推移，～6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,，進而排出第二極體,，再往后大約加精后9～16小時，雌雄原核會出現(xiàn),，而原核的出現(xiàn)才是受精的標志,。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI,，往往錯過了卵子的比較好受精時間,，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精,，胚胎的發(fā)育潛能也很低,。所以，我們在加精后的4～6小時,，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化,。當(dāng)然,，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行補救,，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體,，并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI,；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,，降低多原核受精比率。上海ICSI紡錘體觀測儀紡錘體微管與細胞內(nèi)的其他細胞器存在復(fù)雜的相互作用,。

紡錘體是卵母細胞在減數(shù)分裂過程中形成的一種微管結(jié)構(gòu),，負責(zé)精確分離染色體。然而,，紡錘體對環(huán)境溫度,、滲透壓等外部條件極為敏感，在冷凍保存過程中容易發(fā)生損傷,，導(dǎo)致染色體分離異常,，進而影響卵母細胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量,。因此，如何有效監(jiān)測和評估冷凍過程中紡錘體的變化,，成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題,。紡錘體實時成像技術(shù)的出現(xiàn)，為這一問題的解決提供了可能,。紡錘體實時成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標記技術(shù),，對卵母細胞內(nèi)的紡錘體進行實時、動態(tài)的觀察和記錄,。常用的熒光標記方法包括使用綠色熒光蛋白（GFP）標記微管蛋白,，以及利用特定抗體對紡錘體相關(guān)蛋白進行染色。通過這些方法,，研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài),、位置、動態(tài)變化等信息,，從而準確評估冷凍過程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性,。

    減數(shù)分裂是生物體形成配子（精子和卵子）的過程，其特點是一次DNA復(fù)制后細胞連續(xù)分裂兩次,，形成四個遺傳物質(zhì)相似的子細胞,。在減數(shù)分裂過程中，紡錘體同樣發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,。在減數(shù)分裂Ⅰ的前期,，同源染色體發(fā)生配對、聯(lián)會,、交換和交叉，形成四分體,。這一過程依賴于紡錘體的微管網(wǎng)絡(luò),，它確保了同源染色體能夠正確地配對和交換遺傳信息。隨后,，在減數(shù)分裂Ⅰ的中期,，染色體在紡錘絲的牽引下，排列在赤道板上,。與有絲分裂不同的是,，此時排列在赤道板上的染色體是同源染色體對，而不是姐妹染色單體,。當(dāng)細胞進入減數(shù)分裂Ⅰ的后期,，同源染色體在紡錘體的牽引下分離，分別移向細胞的兩極,。這一過程實現(xiàn)了同源染色體的分離,，為后續(xù)的遺傳重組和配子形成奠定了基礎(chǔ),。在減數(shù)分裂Ⅱ中，紡錘體的作用與有絲分裂更為相似,。姐妹染色單體在紡錘絲的牽引下分離,，分別移向細胞的兩極。這一過程確保了每個子細胞都能獲得完整的染色體組,，從而保證了配子的遺傳完整性,。 紡錘體在細胞分裂后期通過微管切割機制實現(xiàn)染色體分離。

無需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,，從而準確評估冷凍保存的效果,。通過對比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性，研究者可以優(yōu)化冷凍保護劑的配方和濃度,，以及改進冷凍程序,，減少冷凍損傷，提高解凍后卵母細胞的存活率和發(fā)育潛能,。解凍后的卵母細胞在無需染色的情況下,，可以直接通過Polscope系統(tǒng)進行紡錘體觀察。這一技術(shù)能夠迅速評估解凍后卵母細胞的質(zhì)量,，包括紡錘體的形態(tài),、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標,，為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考,。紡錘體的微管從中心體向外輻射，形成紡錘狀結(jié)構(gòu),。昆明紡錘體實時成像紡錘體揭示卵母細胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)

紡錘體的形態(tài)在細胞分裂的不同階段會有所變化,。Hamilton Thorne紡錘體胚胎植入

    近年來，隨著成像技術(shù)的飛速發(fā)展,，特別是紡錘體成像技術(shù)的不斷進步,，科學(xué)家們得以在高分辨率下觀測細胞分裂過程，從而揭示了紡錘體的許多未知特征和機制,。紡錘體成像技術(shù)的發(fā)展可以追溯到上世紀末,，當(dāng)時科學(xué)家們開始利用熒光顯微鏡技術(shù)觀測細胞分裂過程。然而,，由于傳統(tǒng)熒光顯微鏡的分辨率限制,，紡錘體的精細結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化往往難以被清晰捕捉。為了克服這一難題,，科學(xué)家們開始探索更高分辨率的成像技術(shù),，如電子顯微鏡、超分辨率顯微鏡等,。然而,，這些技術(shù)在實際應(yīng)用中面臨著諸多挑戰(zhàn),，如樣品制備復(fù)雜、成像速度慢,、對細胞活性影響大等,。近年來，隨著成像技術(shù)的不斷創(chuàng)新和進步,，紡錘體成像技術(shù)取得了突破性進展,。特別是超分辨率顯微鏡技術(shù)的出現(xiàn)，如結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡（SIM）,、受激輻射損耗顯微鏡（STED）和單分子定位顯微鏡（SMLM）等,，使得科學(xué)家們能夠在納米尺度上觀測紡錘體的精細結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。 Hamilton Thorne紡錘體胚胎植入