二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：5,、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L?！九R床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,，其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,，附睪中含高濃度的肉堿,，主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來(lái)源有關(guān)。現(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,，常反映附睪,、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,，表明附睪,、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,，而果糖含量降低，則提示精囊功能障礙,，附睪功能正常,；精漿肉堿約為正常含量的50%左右，果糖含量正常,，說(shuō)明附睪功能障礙,，精囊功能正常；而肉堿急劇下降,，果糖含量亦減少,，表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙,。6,、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性?！九R床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義,。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活動(dòng),，干擾精子的運(yùn)行,，阻礙精子穿透及精卵結(jié)合，使受精發(fā)生障礙,。即使已經(jīng)受精,，也可能影響發(fā)育中的胚胎，造成免疫性流產(chǎn),。不育夫婦AsAb陽(yáng)性者占25%-30%,，當(dāng)精子輸出管道受阻,、睪丸損傷、炎癥,、附睪等生殖系***時(shí),，系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),，前向性（STR）?：平均路徑的直線性,。南京牛精子分析W.H.O 4

精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量,。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度,，振蕩三分鐘,，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù),，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù),。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000,。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克,、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升,。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí),，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù),。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的,，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的,。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能,。北京快速運(yùn)動(dòng)精子分析WOB精子分析儀因其高效,、J準(zhǔn)的特點(diǎn)，已經(jīng)在眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)中廣泛應(yīng)用,，深受患者信賴,。

精子檢測(cè)是通過(guò)一系列檢測(cè)方法來(lái)評(píng)估男性生育能力的指標(biāo)之一,。而檢測(cè)方法的選擇直接影響到檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前,，常用的檢測(cè)方法有手動(dòng)計(jì)數(shù)法,、顯微鏡計(jì)數(shù)法、電子顯微鏡計(jì)數(shù)法,、精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法等,。手動(dòng)計(jì)數(shù)法是通過(guò)顯微鏡手動(dòng)計(jì)算精液中精子數(shù)量的方法，該方法簡(jiǎn)單易行,，但因操作者技能不同,，容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過(guò)顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,，該方法比手動(dòng)計(jì)數(shù)法更加準(zhǔn)確,，但需要專(zhuān)業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。電子顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過(guò)電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,，該方法非常準(zhǔn)確,，但需要昂貴的設(shè)備。精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法是通過(guò)計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)軌跡來(lái)判斷精子活力和數(shù)量的方法,，該方法不僅準(zhǔn)確性,，而且可以直觀地顯示精子的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，但需要較為復(fù)雜的技術(shù),。除了以上常見(jiàn)的檢測(cè)方法，還有一些新興的檢測(cè)方法,，如流式細(xì)胞術(shù),、全自動(dòng)分析系統(tǒng)等。這些檢測(cè)方法雖然在檢測(cè)精子數(shù)量,、活力等方面具有一定優(yōu)勢(shì),，但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴，目前還沒(méi)有得到廣泛應(yīng)用,。在選擇檢測(cè)方法時(shí),，需要考慮檢測(cè)的目的、檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素,。同時(shí),，需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過(guò)關(guān)等因素導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差,。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果,。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml,、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml,、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52),、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池,、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法,。通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算,，從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號(hào),、廠家差異不盡相同,，操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)，了解工作原理,、操作規(guī)程,、校正方法等，使用前必須仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),。一般儀器都會(huì)經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開(kāi)機(jī)接通電源,，打開(kāi)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果,。2.加樣取液化的**1滴,，滴入精子計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中，置顯微鏡操作平臺(tái)上,，點(diǎn)擊“活動(dòng)顯示”菜單,，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測(cè)標(biāo)本的精子運(yùn)動(dòng)圖像,。3.分析點(diǎn)擊“計(jì)算分析”菜單,，系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析,。4.打印報(bào)告分析結(jié)束后,，可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡(jiǎn)單易懂,，用戶無(wú)需具備專(zhuān)業(yè)知識(shí)也能夠輕松上手使用,。上海綿羊精子分析BCF

WHO第6版明確提出：使用CASA系統(tǒng)須遵循適當(dāng)?shù)某绦虿襟E，才能獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果,。南京牛精子分析W.H.O 4

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長(zhǎng)者,，可呈淡黃色,，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷,。每次排精量為2~6毫升,，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長(zhǎng)度一般不超過(guò)2厘米,，否則視為異常,。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8,。正常精子數(shù)應(yīng)超過(guò)2000萬(wàn)/毫升,。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí)：0級(jí)：不活動(dòng),；1級(jí)：精子原地?cái)[動(dòng),；2級(jí)：有中等的前向運(yùn)動(dòng)；3級(jí)：前向運(yùn)動(dòng)活躍,，快速直線運(yùn)動(dòng),。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,，應(yīng)對(duì)精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析,。采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**,、夢(mèng)遺等情況,，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等,。南京牛精子分析W.H.O 4