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對(duì)卵子進(jìn)行評(píng)估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,,也就是說(shuō)紡錘體的存在與否,,可以用來(lái)評(píng)價(jià)卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過(guò)紡錘體對(duì)我們的卵子進(jìn)行評(píng)估的機(jī)會(huì):(1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對(duì)卵子的紡錘體進(jìn)行觀察,,通過(guò)定量分析數(shù)據(jù)對(duì)卵子進(jìn)行分級(jí),,挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,,進(jìn)而提高試管嬰兒的受精率,。(2)胚胎學(xué)家還可以通過(guò)紡錘體來(lái)確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進(jìn)而為體外成熟卵子進(jìn)行評(píng)估,,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率,。(3)由于紡錘體對(duì)環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時(shí),,只需要10分鐘的時(shí)間,,就會(huì)紡錘體造成不可逆的損傷,。所以冷凍復(fù)蘇過(guò)程中溫度改變很有可能對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,,進(jìn)而可以提高受精率,、卵裂率和臨床妊娠率。綜上所述,,通過(guò)***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率,、卵裂率和臨床妊娠率,,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點(diǎn)不再那么遙遠(yuǎn),。紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的共同影響,。上海Hamilton Thorne紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器
紡錘體檢查點(diǎn)是確保染色體正確分離的重要機(jī)制,其失效會(huì)導(dǎo)致染色體分離錯(cuò)誤,。例如,,某些基因突變(如MAD2突變)會(huì)影響SAC的功能,導(dǎo)致染色體非整倍性的發(fā)生,。SAC信號(hào)傳導(dǎo)異常:SAC通過(guò)復(fù)雜的信號(hào)傳導(dǎo)途徑確保染色體的正確分離,。SAC信號(hào)傳導(dǎo)異常會(huì)導(dǎo)致紡錘體檢查點(diǎn)失效,增加染色體非整倍性的風(fēng)險(xiǎn),。染色體在分裂過(guò)程中未能正確分離,,導(dǎo)致非整倍體的形成。例如,,某些基因突變(如CENP-A突變)會(huì)影響染色體的正確分離,,導(dǎo)致染色體非整倍性的發(fā)生。染色體橋是染色體在分裂過(guò)程中未能完全分離形成的結(jié)構(gòu),,會(huì)導(dǎo)致染色體非整倍性的發(fā)生,。例如,某些基因突變(如PLK1突變)會(huì)影響染色體橋的形成,。北京紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器研究紡錘體的結(jié)構(gòu)和功能有助于深入了解細(xì)胞分裂的復(fù)雜機(jī)制,。
盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中的作用有所不同,但兩者也存在一些共性,。首先,,紡錘體的形成都依賴于中心體的復(fù)制和分離,以及微管的動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)和縮短,。其次,,在有絲分裂和減數(shù)分裂的中期,染色體都排列在赤道板上,,形成了清晰的紡錘體結(jié)構(gòu),。此外,,在有絲分裂和減數(shù)分裂的后期,,染色體的著絲點(diǎn)都一分為二,,導(dǎo)致姐妹染色單體或同源染色體分離,分別移向細(xì)胞的兩極,。這一過(guò)程確保了每個(gè)子細(xì)胞都能獲得完整的染色體組,。盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中存在共性,但兩者也存在明顯的差異,。
冷凍電鏡技術(shù)(Cryo-EM)近年來(lái)在結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域取得了重大突破,,也為紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。通過(guò)將生物樣品冷凍至極低溫并在電子顯微鏡下進(jìn)行觀察和成像,,冷凍電鏡能夠揭示生物大分子的高分辨率結(jié)構(gòu),,包括紡錘體微管等精細(xì)結(jié)構(gòu)。這一技術(shù)不僅克服了傳統(tǒng)電鏡技術(shù)對(duì)樣品制備的嚴(yán)格要求,,還能夠在接近生理狀態(tài)下觀察紡錘體的形態(tài)和功能,,為無(wú)損觀察紡錘體提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。無(wú)損觀察紡錘體技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果,。通過(guò)對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,,以及改進(jìn)冷凍程序,,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能,。紡錘體形成過(guò)程中的任何錯(cuò)誤都可能影響細(xì)胞的命運(yùn),。
紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),,通常認(rèn)為,,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,,然后在3點(diǎn)處注入精子,。但是,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),,***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置,。一項(xiàng)研究提示,在ICSI后,,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng),,或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過(guò)紡錘體觀測(cè)儀,,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,,從而避免在ICSI過(guò)程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠,。有文獻(xiàn)報(bào)道,,在進(jìn)行ICSI時(shí),觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組,。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),,有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,,就能顯出原形,,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低,。紡錘體的主要功能是在細(xì)胞分裂時(shí)牽引染色體分離,確保遺傳信息的正確傳遞,。上海Hamilton Thorne紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器
紡錘體的一端連接著染色體,,另一端則錨定在細(xì)胞兩極。上海Hamilton Thorne紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器
紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性,。在有絲分裂前期,,中心體被復(fù)制形成兩個(gè)中心體,并逐漸分離,,形成兩個(gè)紡錘體,。紡錘體的微管從中心體發(fā)出,與染色體上的著絲粒(kinetochore)結(jié)合,。著絲粒是一組復(fù)雜的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),,可以與微管的末端結(jié)合。當(dāng)纖維束的微管末端與著絲粒結(jié)合時(shí),,纖維束開(kāi)始縮短,,將染色體拉向兩端,實(shí)現(xiàn)染色體的精確分離,。這一過(guò)程不僅確保了每個(gè)新細(xì)胞都能獲得正確數(shù)量的染色體,,還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。上海Hamilton Thorne紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器