**近幾年來,，Piezo-ICSI法（壓電顯微受精法）被高度重視,。使用了Piezo-ICSI法，與常規(guī)的顯微受精技術(shù)相比,，對卵子的損害更小,。結(jié)果顯示，用Piezo法會提高受精率,，之后受精卵的發(fā)育也更好,。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法，與傳統(tǒng)ICSI顯微受精方式不同,，采用平口而不是尖口的精子注射針,，通過超音振動技術(shù)打開卵子透明帶再將精子注入卵子，從而一定程度上減少了注射過程對卵子產(chǎn)生的損害,，使高齡女性胚胎養(yǎng)囊率有所提升,。臨床數(shù)據(jù)顯示，特別是針對一些大齡及反復受精失敗的情況,，Piezo-ICSI比常規(guī)ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%,，受精以后的退化率（即停止分裂）從18.6%降低到11.9%。而妊娠率從14.9%提高到23.1%,。操作穩(wěn)定性更強事實上相較Piezo法,，常規(guī)的顯微受精方法從穩(wěn)定性上更難操作。用汽車來舉例的話,，Piezo法相當于自動檔汽車,，常規(guī)的顯微受精方法相當于手動檔汽車，Piezo法可以縮短培養(yǎng)師的培訓時間,。日本只有10家能做Piezo即使在日本,，采用Piezo法的醫(yī)院也不太多。在日本有600家進行體外受精,、顯微受精的醫(yī)院，而采用Piezo法的醫(yī)院或許也就10家左右,。從現(xiàn)在起Piezo法的優(yōu)勢會得以重新評估,，或許10年，20年后會在世界各地得以普及,?！癙IEZO PMM 6”是一種壓電顯微操作系統(tǒng)，作為壓電注射的先驅(qū),，投入了大量的資源進行其研發(fā),。深圳細胞內(nèi)膜打孔壓電平口針

“ICSI”（intracytoplasmicsperminjection）指卵胞漿單精子注射，其操作主要涉及“精子制動-精子拾取-破膜-注射”幾個步驟,，其中在“破膜”（即使用注射針刺破卵膜,，以便將單個精子送入卵胞漿）這一步,，部分患者的卵子會出現(xiàn)“無破膜感”這一特征，這是怎么回事呢,？原來,，進行ICSI操作的時候，并不是直接用注射針徑直扎破卵膜,。技術(shù)書籍這樣描述道：“調(diào)節(jié)顯微操作作針和卵膜至同一水平面,，將注射針中的精子推至針尖處，注射針從卵子3點鐘位置穿入透明帶并繼續(xù)進針,，至卵中心或越過中心位置,。由于卵膜的彈性，進針處卵膜出現(xiàn)‘漏斗狀’,，但卵膜仍未破裂,，需輕微回吸注射針以確認膜破裂。一旦刺破卵膜可見到胞漿和精子的一個‘快速反流’的過程或可見卵膜‘回彈’現(xiàn)象,，之后將精子注入卵子胞質(zhì)內(nèi),。這是正常情況下的破膜操作，而文章開頭提到的“無破膜感”,，則是指注射針穿入透明帶的同時也立即穿透卵膜,，不形成漏斗狀結(jié)構(gòu)，看不到胞漿的快速返流或回彈現(xiàn)象,。學術(shù)界給具有這一特征的卵子細胞膜起了個特有名稱——脆性卵膜,。上海prime tech壓電活檢PMM 6 MB-D-2中等力度輸出型號，適用于ICSI,、ES細胞注射,、活檢操作等。

為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化,？如下：一,、卵子成熟度不足。卵子的成熟包括核成熟（以排出***極體為標志）以及胞質(zhì)成熟,，而胞質(zhì)成熟往往滯后于核成熟,，兩者并不完全同步。有對照研究表明,，脆性卵膜組的成熟卵細胞比例***低于正常破膜組,，ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組，這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關(guān)性,，并**終影響了卵子ICSI后是否存活,。二、雌***水平。到目前為止,，關(guān)于雌***水平對脆性卵膜的影響,，現(xiàn)有的研究結(jié)論并不一致，但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性,。三,、ICSI機械操作。一方面ICSI是侵襲性操作,，可能破壞卵膜,、細胞骨架等細胞器，另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護作用,，細胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解,。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化，除了改善注射方式（如進針前利用激光穿透或削薄透明帶,，操作盡可能輕柔等）,，還可采用改進的Piezo-ICSI（壓電脈沖破膜輔助ICSI），能有效改善注射后卵子退化的情況,。此外,，在臨床促排卵方面，也可考慮調(diào)整藥物用量,，在保證卵泡大小均勻的情況下,，盡量推遲扳機時間，提高卵母細胞成熟度,，減輕ICSI后卵子退化的比例,，以盡可能保證ART***的效果。

Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤,；按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處,，在20-25℃室溫下,，準備進行顯微操作。具體操作前,，首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用,；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合；再將單個精子從尾部吸入注射針,，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾,；連續(xù)剪切5個精子后,，將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細胞的操作滴中,，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質(zhì)中。注射時，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞,，使紡錘體保持在6點或12點的位置,，從3點的方向輕輕進針，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶,，將透明帶碎片吹出注射針的同時,，將精子頭吹至針尖處，繼續(xù)進針,，直至針尖插入卵母細胞深處,，幾乎貼近對側(cè)質(zhì)膜時，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質(zhì)膜,，將精子頭吐出,，回吸注入卵內(nèi)多余的操作液，輕輕退針,，完成一次注射,。依次操作，盡快實現(xiàn)該批卵母細胞的注射,，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,，并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射,，在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射,。壓電式顯微操作儀PMM可用于ES細胞注射等實驗。

輔助生殖4大通用技能一技能：人工授精二技能：體外受精三技能：卵巢移植四技能：單精子顯微注射技術(shù)一般而言,，體外受精是妥妥的主加技能,，應用***。1.單精子顯微注射技術(shù)單精子顯微注射技術(shù)（簡稱ICSI,，即Intracytoplasmicsperminjection的英文縮寫）指胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù),。該技術(shù)是借助顯微操作系統(tǒng)將單個精子頭注入小鼠卵子胞漿內(nèi),使卵子受精，體外培養(yǎng)到早期胚胎,，再放回母體子宮內(nèi)發(fā)育著床,。在臨床上，ICSI即第二代“試管嬰兒技術(shù)”,。PMM和傳統(tǒng)方法相比提高了速度和準確率,也就是說增加了效率,。深圳細胞內(nèi)膜打孔壓電轉(zhuǎn)基因

PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。深圳細胞內(nèi)膜打孔壓電平口針

注射—將含一個已制動精子的注射管輕柔刺破透明帶和卵膜,，進入卵母細胞中心,。注入精子時，應盡可能少地帶入培養(yǎng)液,。之后使用負壓破壞卵膜,，隨后輕柔抽吸細胞質(zhì),。精子置入、穿過卵膜和抽吸細胞質(zhì)以***卵母細胞的不同方法對受精和胚胎發(fā)育率的影響是一個研究熱點,。壓電輔助的ICSI是一種新型方法,，目前已在有ICSI結(jié)局不良病史和MⅡ期卵母細胞有限的患者中使用。在ICSI操作過程中,，該技術(shù)對卵母細胞的損傷較小且可改善受精率和胚胎質(zhì)量,。目前使用壓電驅(qū)動管的新型ICSI注射技術(shù)已成功用于多種哺乳動物。由于該注射器采用超聲切割力(而不是刺穿力)穿透卵膜,，注射過程中卵母細胞幾乎沒有變形,，因此其對卵母細胞的損傷大幅減少。該技術(shù)實現(xiàn)的存活率和成功率同樣高,。注射后,，根據(jù)標準實驗室方案培養(yǎng)卵母細胞。受精ICSI后,，受精率為50%-80%,。雖然ICSI不可保證一定受精，但完全受精失敗的發(fā)生率較低,，通常發(fā)生于獲卵數(shù)較低的周期,。受精失敗的原因通常不是未置入精子或卵母細胞排出精子。其可能是由于卵母細胞***失敗,，這通常與卵母細胞質(zhì)量較差或精子無活性有關(guān),。深圳細胞內(nèi)膜打孔壓電平口針