**近幾年來,，Piezo-ICSI法（壓電顯微受精法）被高度重視。使用了Piezo-ICSI法,，與常規(guī)的顯微受精技術相比,，對卵子的損害更小。結果顯示,，用Piezo法會提高受精率,，之后受精卵的發(fā)育也更好。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法,，與傳統(tǒng)ICSI顯微受精方式不同,，采用平口而不是尖口的精子注射針，通過超音振動技術打開卵子透明帶再將精子注入卵子,，從而一定程度上減少了注射過程對卵子產生的損害,，使高齡女性胚胎養(yǎng)囊率有所提升。臨床數據顯示,，特別是針對一些大齡及反復受精失敗的情況,，Piezo-ICSI比常規(guī)ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%，受精以后的退化率（即停止分裂）從18.6%降低到11.9%,。而妊娠率從14.9%提高到23.1%,。操作穩(wěn)定性更強事實上相較Piezo法，常規(guī)的顯微受精方法從穩(wěn)定性上更難操作,。用汽車來舉例的話,，Piezo法相當于自動檔汽車，常規(guī)的顯微受精方法相當于手動檔汽車,，Piezo法可以縮短培養(yǎng)師的培訓時間。日本只有10家能做Piezo即使在日本,，采用Piezo法的醫(yī)院也不太多,。在日本有600家進行體外受精、顯微受精的醫(yī)院,，而采用Piezo法的醫(yī)院或許也就10家左右,。從現在起Piezo法的優(yōu)勢會得以重新評估，或許10年,，20年后會在世界各地得以普及,。PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。日本精子制動壓電

Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤,；按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處,，在20-25℃室溫下,，準備進行顯微操作,。具體操作前，首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用,；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合,；再將單個精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾,；連續(xù)剪切5個精子后,，將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中,。注射時,，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞，使紡錘體保持在6點或12點的位置,，從3點的方向輕輕進針,，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時,，將精子頭吹至針尖處,，繼續(xù)進針，直至針尖插入卵母細胞深處,，幾乎貼近對側質膜時,，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜，將精子頭吐出,，回吸注入卵內多余的操作液,，輕輕退針，完成一次注射,。依次操作,，盡快實現該批卵母細胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,，并且移入CO?箱培養(yǎng),。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射，在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射,。透明帶打孔壓電壓電注射PRIME TECH 公司生產的PMM 150FU為全世界較早的壓電破膜儀,。

卵子***是人類胚胎發(fā)育的起始步驟，該過程主要由細胞內的鈣釋放調控,，當成熟的卵母細胞發(fā)育到MII期后,，只有精子的PLCζ進入卵母細胞的胞漿，才能***鈣震蕩,，促使卵母細胞完成完整的減數分裂,。TFF(Totalfertilizationfailure，完全受精失敗)是指MII期卵母細胞無法完成受精的過程,，有1-3%的ICSI失敗是源于IFF,。TFF與精子及卵子的異常均有關,，其中卵子***異常是主要因素。卵子因素主要是由蛋白合成不足或異常信號傳導導致的胞質不成熟,；精子因素主要是PLCζ蛋白的結構,、表達和定位異常。受精失敗與女方年齡,、不育類型和取卵數目等因素無關,。精子的解凝功能異常和魚精蛋白缺失與TFF密切相關。精子染色質組裝異?；蚓覦NA損傷可導致精子的解凝異常,，無法***卵子及合子形成。研究表明精子染色質組裝異常的精子中精子解凝功能受阻的精子比例高于正常精子,。精細胞染色質的魚精蛋白的合成與組裝對于精細胞的基因組濃縮也是非常重要的,。若魚精蛋白的量減少，精子在ICSI后提前解凝,，導致受精失敗,。當精子進入卵子后精子染色質提前濃縮也導致其提前解凝，精子和卵子遺傳物質的同步節(jié)奏被打破,，也造成受精失敗,。不過這種同步性異常主要還是卵子因素造成的。

下面我們利用壓電陶瓷測試壓電效應和逆壓電效應,。常用的壓電陶瓷是由鋯鈦酸鉛（PZT）材料做成的,。將PZT材料做成的壓電陶瓷片粘在圓形黃銅片上就構成了壓電陶瓷元件。它具有明顯的壓電效應,。首先,，將壓電陶瓷片A的兩根引線通過一個按鈕開關與信號發(fā)生器相聯。將壓電陶瓷片B的兩根引線與擴音器（帶喇叭）的輸入端相連,。將A,、B兩個壓電陶瓷片用黑封泥固定在同一個木板制成的箱子上。當觀察者將按鈕開關按下,，接通信號發(fā)生器和壓電陶瓷A時，由于逆壓電效應,，A開始振動,，并把振動傳給木箱，木箱的振動傳給壓電陶瓷B,，由于壓電效應,，使B兩邊產生變化電信號，再傳給擴音器使喇叭發(fā)聲,，所以這個實驗同時演示了壓電效應和逆壓電效應,。壓電顯微操作儀PMM 6可用于豬卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗,。

壓電打火機的電壓陶瓷元件產生的瞬間電壓用什么儀器可以測量呢？起初,，我們試圖用普通指針式多用電表直流高壓擋測量,，發(fā)現每次按動點火元件的黑色塑料壓桿時，由于兩個電極接出的電壓只能使指針略微抖動一下,。分析原因是,，因為電壓脈沖持續(xù)時間甚短，指針慣性較大,，指針無法同步體現電壓的變化做大幅偏轉,。換用數字顯示型多用電表，本以為其無指針慣性影響,，應該能讀出瞬間高電壓來,，誰知事與愿違，我們根本看不到預想的高電壓讀數,，只能看到一些變換不定的低電壓數據,。分析起來，這是由于液晶顯示響應速度較慢,，點火電壓脈沖持續(xù)時間甚短,，來不及顯示比較高瞬間電壓，只能顯示電壓降落（較平緩階段）過程中的某些隨機電壓讀數,。***,，我們搬出實驗室的“重磅武器”──示波器，再做一試,。我們用的是實驗室**普通的J2459型學生示波器,，連接線為兩條普通的帶終魚夾的導線。從理論上講,，示波器是利用電子束偏轉后打在熒光屏上顯示光點移動的,，電子束慣性極小，應該能“跟蹤”上點火高壓脈沖的變化,，實驗結果不出所料,。PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。上海透明帶穿孔壓電油壓注射器

PMM與傳統(tǒng)尖頭針相比可促進ES細胞注射入胚泡,用于胚胎干細胞顯微注射（ES cell Microinjection）,。日本精子制動壓電

雖然Piezo-ICSI對于大齡試管準媽媽們的***來說非常有意義,，但這項技術的使用卻對生殖中心有著比較高的門檻。日本英醫(yī)院擁有三臺Piezo-ICSI儀器,，儀器的顯微鏡來自日本精工企業(yè),，手動精密操作臺來自德國。作為**精密儀器,，它的每一個組件成本都達百萬,，整體造價超過千萬,。使用Piezo-ICSI不單單是設備升級，對培養(yǎng)師的操作要求和難度也是直線升級的,。具體說來,，因為受精操作是在高倍顯微鏡下利用操作桿來進行的，需要培養(yǎng)師同時配合操作觀察操作桿,、顯微鏡,、受精針和顯示屏。這么聽起來是不是感覺難度似乎還可以,？然而事實上,，在操作的過程中，培養(yǎng)師需要不斷的進行距離判斷的「切換」：想象一下,，**挪動1cm,，鏡下實際只會挪動0.1mm，但出現在視野中的范圍,，實際上會有5cm那么大,！日本精子制動壓電