二,、生化及免疫學(xué)檢驗：5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L,?！九R床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,，其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,，附睪中含高濃度的肉堿,，主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)。現(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,，常反映附睪,、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,，表明附睪,、精囊功能正常,。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%，而果糖含量降低,，則提示精囊功能障礙,，附睪功能正常；精漿肉堿約為正常含量的50%左右,，果糖含量正常,，說明附睪功能障礙，精囊功能正常,；而肉堿急劇下降,，果糖含量亦減少，表示精囊,、附睪功能均發(fā)生障礙,。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性,?！九R床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,，可抑制精子的活動,，干擾精子的運(yùn)行，阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,，使受精發(fā)生障礙,。即使已經(jīng)受精，也可能影響發(fā)育中的胚胎,，造成免疫性流產(chǎn),。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%，當(dāng)精子輸出管道受阻,、睪丸損傷,、炎癥、附睪等生殖系***時,，系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體,。在精子研發(fā)的歷程中，計算機(jī)輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機(jī),、彩色圖像檢測,。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測。馬精子分析W.H.O 5

精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,，**標(biāo)本液化后吸入計數(shù)，通過顯微鏡放大后,，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動,、靜態(tài)圖像后輸入計算機(jī),。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動移位及運(yùn)動參數(shù),，對采集圖像進(jìn)行精子密度,、活動力、活動率,、運(yùn)動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,，由計算機(jī)處理后，打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”,。一次能對1000個精子進(jìn)行動態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測[1],。優(yōu)點(diǎn)：操作簡便,，用量少，檢測速度快,，重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,，并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度,、活力,、精子分級等，還可提供精子運(yùn)動狀態(tài)的多種參數(shù)等,。缺點(diǎn)：影響分析結(jié)果的因素較多,，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果,。密度精子分析BCFHamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性,，能夠長時間穩(wěn)定運(yùn)行，保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,。

世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實(shí)驗室檢驗手冊》于1980年***出版,，以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實(shí)驗室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南,，旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實(shí)驗室結(jié)果的可比性,。在過去40年里，該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年,、1992年,、1999年和2010年)，內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序,、精子功能,、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等,，已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn),，被世界各地臨床和實(shí)驗室***使用,。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實(shí)驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性,、多中心臨床研究的結(jié)果,，通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,，即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長,。它是男科實(shí)驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實(shí)驗室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊,。該手冊在國際大會,、科學(xué)會議、以及WHO合作中心,、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項目中進(jìn)行了***傳播,。截止到2021年，已被3000余篇同行評議論文和評論引用,。

采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活,，并且不得有**、夢遺等情況,，還應(yīng)禁煙戒酒,，忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,，采精前用溫水將雙手,、**，尤其是**洗凈,?？刹捎?*法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,，開頭部分來自前列腺,、附睪及壺腹，伴有大量精子,，***部分來自精囊,，故應(yīng)收集整份精液，不要遺漏任何部分,，尤其是開頭部分,。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈,、無菌,、干燥，采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同；瓶子不應(yīng)過大,，但瓶口不應(yīng)過小,，以免將精液射出瓶外；還應(yīng)貼上標(biāo)簽,，記錄姓名及取精時間,。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫，放置在貼身內(nèi)衣袋中,，不可傾斜或倒置,，盡可能在1小時內(nèi)送到實(shí)驗室。選擇合適的CASA檢測原理和設(shè)備,，確保幀率要求,，避免因設(shè)備問題影響檢測結(jié)果?。

精液顯微鏡檢查(1)精子存活率：排精后30～60分鐘,，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%,，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動力：指精子活動狀態(tài),，也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級：①精子活動好,，運(yùn)動迅速,，活潑有力，直線向前運(yùn)動,；②精子活動較好,，運(yùn)動速度尚可，游動方向不定,，呈直線或非直線運(yùn)動,，帶有回旋；③精子運(yùn)動不良,，運(yùn)動遲緩,，原地打轉(zhuǎn)或抖動，向前運(yùn)動能力差,；④死精子,，精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,，若＞40%的精子活動不良(③,、④)級，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因,。精子活動力低,，主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥,、雄***等所致,。CASA系統(tǒng)主要用于精子動力學(xué)的分析，可以評估精子的濃度,、活力等參數(shù),。廣州前向運(yùn)動精子分析重復(fù)性高

精子分析儀參數(shù)，精子頭側(cè)擺幅度（ALH）?：精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度,。馬精子分析W.H.O 5

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號,、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn),，了解工作原理,、操作規(guī)程、校正方法等,，使用前必須仔細(xì)閱讀說明書,。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開機(jī)接通電源，打開計算機(jī)輔助**分析系統(tǒng),。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果,。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,，置顯微鏡操作平臺上,，點(diǎn)擊“活動顯示”菜單，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,，顯示器上即可顯示待測標(biāo)本的精子運(yùn)動圖像,。3.分析點(diǎn)擊“計算分析”菜單，系統(tǒng)進(jìn)入自動分析狀態(tài),，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析,。4.打印報告分析結(jié)束后，可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果,。馬精子分析W.H.O 5