Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),,同時(shí),,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng),。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng),、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離,、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等,。NEAA(非必須氨基酸),,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸,、L-天(門)冬酰胺,、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝,。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,,PH值~,適合細(xì)胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點(diǎn),,研究表明酚紅可以模擬固醇類(特別是雌)的作用,因此在用到雌敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),,較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基,。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測,。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡,。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸,、微量鐵離子以及**酸鈉。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg,。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-,。但是,,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-),。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為,。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換,。HEPES是一種非離子緩沖液,,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,,在高濃度時(shí)對一些細(xì)胞可能有毒,。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。安徽RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基廠家McCoy’s5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium5A,,McCoy’s 5A含有還原型谷胱甘肽、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖,。
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基,、合成細(xì)胞培養(yǎng)基,、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類,。(balancedsaltsolution,,BSS)BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗,、配制其他試劑等,。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液,。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,,參與細(xì)胞粘附等功能,,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán),。此外,,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,,適合于密閉培養(yǎng),;后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件,。表1-1幾種常用的BSS配方,。
成分說明:貨號L-谷氨酰胺L-丙氨酰-L-谷氨酰葡萄糖HEPES酚紅雙抗HCY-BCM07001★★★HCY-BCM07001A★★★★HCY-BCM07002★★★★HCY-BCM07002A★★★★★HCY-BCM07003★★★HCY-BCM07004★★HCY-BCM07005★★★HCY-BCM07006★★★★HCY-BCM07007★★HCY-BCM07008★★★HCY-BCM07009★★HCY-BCM07010★HCY-BCM07011★★HCY-BCM07012★★★HCY-BCM07013★★HCY-BCM07014★HCY-BCM07015★★HCY-BCM07016★★★HCY-BCM07017★HCY-BCM07018★★HCY-BCM07019★HCY-BCM07020HCY-BCM07021★★HCY-BCM07022★HCY-BCM07023ATCC改良HCY-BCM07024Dutch改良HCY-BCM07025不含葉酸HCY-BCM07026不含蛋氨酸不含葡萄糖不含酚紅HCY-BCM07027SILACRPMI-1640FlexHCY-BCM07028SILACRPMI-1640RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。McCoy’s 5A常用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),,如骨髓、皮膚,、牙齦,、腎、脾,、肺,、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等,。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,,維生素的含量增加了4倍,,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等,。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),,后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快,、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞,、克隆細(xì)胞,、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞,、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),,例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢,、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,,方便快捷,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。 Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時(shí),特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),。安徽RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基廠家
Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
DMEM,,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基,,在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域占據(jù)著極為重要的地位。它源于經(jīng)典的 Eagle 培養(yǎng)基,,經(jīng)科學(xué)家 Dulbecco 改良優(yōu)化后,,煥發(fā)出全新活力,。DMEM 培養(yǎng)基成分豐富,,氨基酸濃度是原始 Eagle 培養(yǎng)基的兩倍,還涵蓋了非必需氨基酸,,為細(xì)胞蛋白質(zhì)合成筑牢根基,。其維生素含量亦是 Eagle 培養(yǎng)基的四倍之多,積極參與細(xì)胞內(nèi)各類代謝反應(yīng),,助力細(xì)胞維持正常生理功能,。同時(shí),培養(yǎng)基中包含酸,,這一糖酵解途徑的關(guān)鍵物質(zhì),,在細(xì)胞能量供應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用,時(shí)刻為細(xì)胞的生命活動提供動力支持,。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
深圳市華晨陽科技有限公司是一家有著先進(jìn)的發(fā)展理念,,先進(jìn)的管理經(jīng)驗(yàn),在發(fā)展過程中不斷完善自己,,要求自己,,不斷創(chuàng)新,時(shí)刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司,,在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中匯聚了大量的人脈以及**,,在業(yè)界也收獲了很多良好的評價(jià),這些都源自于自身的努力和大家共同進(jìn)步的結(jié)果,,這些評價(jià)對我們而言是比較好的前進(jìn)動力,,也促使我們在以后的道路上保持奮發(fā)圖強(qiáng)、一往無前的進(jìn)取創(chuàng)新精神,,努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個(gè)新高度,,在全體員工共同努力之下,全力拼搏將共同深圳市華晨陽科技供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來,,創(chuàng)造更有價(jià)值的產(chǎn)品,,我們將以更好的狀態(tài),更認(rèn)真的態(tài)度,更飽滿的精力去創(chuàng)造,,去拼搏,,去努力,讓我們一起更好更快的成長,!