翻譯后修飾蛋白組學分析：蛋白質(zhì)組學的研究的工作不只聚焦于細胞不同生長時期或是疾病條件下的蛋白質(zhì)表達水平變化,，許多至關(guān)重要的生命進程不只由蛋白質(zhì)相對豐度控制，更重要的是被時空特異分布的,、可逆的翻譯后修飾所調(diào)控,，因而揭示翻譯后修飾發(fā)生規(guī)律是解析蛋白質(zhì)復雜多樣的生物功能的一個重要前提。蛋白質(zhì)發(fā)生翻譯后修飾時其分子質(zhì)量會發(fā)生響應(yīng)的改變,，通過質(zhì)譜能夠精確測定蛋白質(zhì)或多肽的分子質(zhì)量,。同時,，發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)再樣本中含量低且動態(tài)范圍廣，所以在質(zhì)譜檢測前需要對發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)或肽段進行富集,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學磷酸化修飾具有簡單的特性,。棕櫚?；揎椀鞍踪|(zhì)組學技術(shù)服務(wù)

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學：蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價修飾方式之一,。磷酸化修飾本身所具有的簡單、靈活,、可逆的特性,，以及磷酸基團的供體ATP的易得性，使得磷酸化修飾被真核細胞所選擇接受成為一種比較普遍的調(diào)控手段,。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程,，幾乎調(diào)節(jié)著包括細胞的增殖、發(fā)育,、分化,、細胞骨架調(diào)控,、細胞凋亡,、神經(jīng)活動,、肌肉收縮,、新陳代謝發(fā)生等生命活動的所有過程,，并且可逆的蛋白質(zhì)磷酸化是目前所知道的比較主要的信號轉(zhuǎn)導方式,。目前已經(jīng)知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起,，而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導致的后果,。南京氧化修飾蛋白質(zhì)組學價錢質(zhì)譜是蛋白質(zhì)翻譯后修飾檢測的常用技術(shù)之一,。

翻譯后修飾蛋白組分析：蛋白質(zhì)翻譯后修飾是影響蛋白質(zhì)功能并調(diào)節(jié)整個細胞過程的重要方式,，幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)對揭示蛋白質(zhì)的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義,。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,，這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。因此,，要在蛋白質(zhì)組學的范圍內(nèi)表征翻譯后修飾蛋白,，純化方法是必要的，以分離修飾蛋白和肽段,，然后再進行后續(xù)分析,。后續(xù)分析一般采用質(zhì)譜技術(shù)進行，可以對翻譯后修飾蛋白組進行定性和定量研究,。

翻譯后修飾蛋白組學分析：在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,，蛋白會首先被酶切成肽段，然后進入質(zhì)譜進行分析,。通過質(zhì)譜分析,，得到的是一系列肽段的分子質(zhì)量信息,。對于某一個特定肽段而言，在沒有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下,，其序列信息和分子量是確定的,。當它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后，例如磷酸化修飾,，由于序列信息和分子量是確定的,，磷酸根的分子量也是確定的。在質(zhì)譜檢測過程中發(fā)現(xiàn)其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,，假設(shè)這個肽段就發(fā)生了磷酸化修飾,，再通過二級質(zhì)譜圖進行二次確認。蛋白質(zhì)翻譯后修飾可以改變蛋白質(zhì)的物理,、化學性質(zhì),。

翻譯后修飾蛋白的檢測方法：翻譯后修飾蛋白的檢測技術(shù)包括有免疫沉淀、western blot,、質(zhì)譜技術(shù),、體外生化分析等。其中,，免疫沉淀是大多數(shù)翻譯后修飾檢測中的關(guān)鍵步驟,，它利用蛋白特異性抗體或某種翻譯后修飾的特異性抗體來富集目標蛋白，之后再用western blot或質(zhì)譜技術(shù)分析目標蛋白,。Western blot和質(zhì)譜技術(shù)均可用于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的下游檢測,，其中Western blot相對簡單但依賴于特異性抗體且無法識別單個蛋白質(zhì)變化，質(zhì)譜則可以檢測包括未知PTM在內(nèi)的幾乎所有的PTMs但成本更高需要專業(yè)知識來分析產(chǎn)生的大量數(shù)據(jù),。研究人員可以根據(jù)成本,、有無可用抗體，以及有沒有目標等選擇合適的方法進行檢測,。在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,，蛋白會首先被酶切成肽段，然后進入質(zhì)譜進行分析,。濟南琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學分析方法

常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括磷酸化。棕櫚?；揎椀鞍踪|(zhì)組學技術(shù)服務(wù)

質(zhì)譜分析蛋白翻譯后修飾：相對于蛋白質(zhì)印跡等技術(shù),，質(zhì)譜技術(shù)能更有效的對蛋白質(zhì)的翻譯后修飾進行分析，且可以對常規(guī)的Western blot 翻譯后修飾蛋白鑒定進行補充,。質(zhì)譜分析蛋白翻譯后修飾一般使用自下而上的基于肽段的方法,。但是自下而上的質(zhì)譜方法無法保證可以完全識別目的蛋白的特定翻譯后修飾，因為質(zhì)譜是通過蛋白質(zhì)序列內(nèi)的多個肽段來鑒定的,，這很大程度上降低了翻譯后修飾肽段被識別的機會,。一種提高質(zhì)譜儀檢測到修飾肽段數(shù)量的策略是使用PTM親和試劑進行肽段富集,，而不是使用PTM親和試劑進行蛋白富集，這將減少富集的未修飾肽段的數(shù)量,。棕櫚?；揎椀鞍踪|(zhì)組學技術(shù)服務(wù)

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