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蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用是蛋白質(zhì)發(fā)揮功能的主要機(jī)制之一,在DNA損傷修復(fù),自噬和代謝等過(guò)程中都扮演著非常重要的角色,蛋白相互作用異常便會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生.在蛋白質(zhì)的賴氨酸,絲氨酸和蘇氨酸等氨基酸殘基上,可發(fā)生甲基化,乙?;?磷酸化和泛素化等200多種翻譯后修飾,這些修飾通常能改變蛋白質(zhì)的電性,疏水性和空間結(jié)構(gòu)等屬性,為與之結(jié)合的蛋白提供結(jié)合的錨定或產(chǎn)生位阻效應(yīng),像一把開(kāi)關(guān)在時(shí)空上精確調(diào)控蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的發(fā)生以及動(dòng)態(tài)變化.結(jié)構(gòu)研究表明,蛋白質(zhì)之間的相互作用通常由臨近的幾個(gè)氨基酸殘基直接結(jié)合,替換該區(qū)域的氨基酸殘基,通常能破壞結(jié)合,使其失去部分功能或酶活性,可以針對(duì)性地開(kāi)發(fā)和設(shè)計(jì)抑制劑,用于疾病的診療,。在早期的研究中,乙?;揎椧恢北徽J(rèn)為是真核細(xì)胞所特有的一種翻譯后修飾,。湖北棕櫚酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)研究
什么是蛋白質(zhì)的翻譯后修飾,?蛋白質(zhì)的翻譯后修飾()是指蛋白質(zhì)在翻譯后的化學(xué)修飾,。對(duì)于大部分的蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō),這是蛋白質(zhì)生物合成的較后步驟,。PTM是細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中的重要組成部分,。通過(guò)向修飾基團(tuán)添加一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基或通過(guò)蛋白質(zhì)水解切割該基團(tuán)來(lái)改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),是蛋白質(zhì)生物學(xué)功能表達(dá)的重要步驟,。生物蛋白質(zhì)的翻譯后修飾極大地增加了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的類型和功能,。這個(gè)過(guò)程調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄,并影響表觀遺傳學(xué),。上海蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學(xué)鑒定蛋白質(zhì)乙?;揎椊M學(xué)技術(shù)對(duì)細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的刺激有著重要的作用。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾有什么生物學(xué)意義,?可以使蛋白質(zhì)具有生物活性,,可以發(fā)揮相應(yīng)的功能。翻譯是蛋白質(zhì)生物合成(基因表達(dá)中的一部分,,基因表達(dá)還包括轉(zhuǎn)錄)過(guò)程中的第二步(轉(zhuǎn)錄為第1步),,翻譯是根據(jù)遺傳密碼的中心法則,將成熟的信使RNA分子(由DNA通過(guò)轉(zhuǎn)錄而生成)中“堿基的排列順序”(核苷酸序列)解碼,,并生成對(duì)應(yīng)的特定氨基酸序列的過(guò)程,。但也有許多轉(zhuǎn)錄生成的RNA,如轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA),、核糖體RNA(rRNA)和小核RNA(snRNA)等并不被翻譯為氨基酸序列,。
蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)技術(shù):泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。此外,,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細(xì)胞周期,、細(xì)胞凋亡,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動(dòng),。樣品要求:1,、SDS-PAGE條帶:5個(gè)以上可見(jiàn)考染條帶。2,、溶液(目標(biāo)蛋白質(zhì)):目標(biāo)蛋白總量>50μg,,目標(biāo)蛋白濃度>80%,。3、溶液(大規(guī)?;旌系鞍踪|(zhì)):蛋白總量>1mg,,蛋白濃度>1μg/μl。蛋白質(zhì)磷酸化修飾鑒定方法有免疫印跡技術(shù),。
蛋白質(zhì)乙?;揎椊M學(xué)定量分析:1. SILAC細(xì)胞標(biāo)記,組織/細(xì)胞破碎,,提取,、提純目的蛋白質(zhì)(基于SILAC的乙酰化修飾組學(xué)定量),。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段,。3. 對(duì)多肽片段進(jìn)行iTRAQ標(biāo)記(基于iTRAQ的乙酰化修飾組學(xué)定量),。4. 使用高效特異性乙?;贵w對(duì)乙酰化修飾肽段進(jìn)行免疫富集,。5. 使用LC-MS/MS對(duì)富集的乙?;亩芜M(jìn)行序列分析。6. 數(shù)據(jù)分析,,比對(duì)不同樣本中蛋白乙?;揎椝讲町悾?duì)產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進(jìn)行解釋,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)磷酸化修飾具有簡(jiǎn)單的特性,。廣東琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù)
質(zhì)譜可以分辨蛋白質(zhì)修飾前和修飾后分子量上的變化,。湖北棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)研究
翻譯后修飾蛋白組:翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學(xué)水平上對(duì)存在翻譯后修飾的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細(xì)胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白,。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后經(jīng)歷的一個(gè)共價(jià)加工過(guò)程,。蛋白翻譯后修飾通過(guò)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上加修飾基團(tuán)或通過(guò)蛋白質(zhì)水解去基團(tuán)而改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能,。經(jīng)過(guò)翻譯后修飾的蛋白質(zhì)稱為翻譯后修飾蛋白,。目前,已知的蛋白質(zhì)翻譯后修飾主要包括糖基化,、磷酸化,、乙酰化、泛素化,、二硫鍵配對(duì),、甲基化和亞硝基化等等。湖北棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)研究
上海拜譜生物科技有限公司位于東川路555號(hào)丙樓1171室,。公司自成立以來(lái),以質(zhì)量為發(fā)展,,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),公司旗下多組學(xué)服務(wù),,質(zhì)譜檢測(cè),,蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué)深受客戶的喜愛(ài),。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,,在商務(wù)服務(wù)深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),,以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),,發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造商務(wù)服務(wù)良好品牌,。在社會(huì)各界的鼎力支持下,,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),,為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持,。