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來源: 發(fā)布時間:2022-03-29

蛋白磷酸化檢測方法:質(zhì)譜檢測方法優(yōu)勢:1. 準(zhǔn)確度高,能夠同時檢測多個蛋白的多個磷酸化位點,。2. 適用于大規(guī)模分析蛋白磷酸化水平,。3. 不依賴于磷酸化抗體,。在實際應(yīng)用中,,Western Blot與質(zhì)譜分析方法各有各的好,誰也無法完全被另一種方法所替代,。所以在選擇測定磷酸化修飾的時候還應(yīng)該根據(jù)具體需要來決定,。如果研究的蛋白正好有商業(yè)化的磷酸化抗體,那么lucky you,,你可以選擇Western Blot進(jìn)行快速磷酸化測定研究,。但是如果你所研究的蛋白質(zhì)沒有可用的商業(yè)化磷酸抗體,或是抗體價效過低,,亦或是需要大規(guī)模地檢測細(xì)胞內(nèi)磷酸化蛋白的水平的話,,質(zhì)譜檢測會是更好地選擇。自中而下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可用于組蛋白修飾的分析,。杭州丙二?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析價格

什么是蛋白質(zhì)的翻譯后修飾?蛋白質(zhì)的翻譯后修飾()是指蛋白質(zhì)在翻譯后的化學(xué)修飾,。對于大部分的蛋白質(zhì)來說,,這是蛋白質(zhì)生物合成的較后步驟。PTM是細(xì)胞信號傳導(dǎo)中的重要組成部分,。通過向修飾基團(tuán)添加一個或多個氨基酸殘基或通過蛋白質(zhì)水解切割該基團(tuán)來改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),,是蛋白質(zhì)生物學(xué)功能表達(dá)的重要步驟。生物蛋白質(zhì)的翻譯后修飾極大地增加了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的類型和功能,。這個過程調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄,,并影響表觀遺傳學(xué)。亞硝基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)類型蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)具有有效性,。

蛋白質(zhì)乙?;揎椀墓δ埽耗壳皩σ阴;揎椀墓δ苎芯恐饕性趯?xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控,,以及對代謝通路的調(diào)控這兩個方面,。在眾多乙?;揎椀牡鞍踪|(zhì)中,,研究較多的要數(shù)細(xì)胞核中包圍DNA的組蛋白了。組蛋白和DNA纏繞構(gòu)成核小體,,組蛋白的甲基化,、乙酰化修飾能夠調(diào)節(jié)DNA纏繞的松緊度,,從而對基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控,,因此,組蛋白的翻譯后修飾是表觀遺傳學(xué)研究中的重要一環(huán),。另外,,研究也發(fā)現(xiàn)乙?;揎椘毡榇嬖谟谌说亩喾N代謝酶之中,并且參與調(diào)控代謝通路以及代謝酶的活性,。其中在肝臟這樣的代謝中就存在著多種代謝酶被高度乙?;?/p>

蛋白質(zhì)翻譯后修飾分析策略:早期蛋白質(zhì)組研究的大部分工作集中在細(xì)胞生長的不同時期,,或疾病或有絲分裂原刺激后的蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化,。然而,許多生命過程不只受蛋白質(zhì)的相對豐度控制,,還受時空分布可逆的翻譯后修飾控制,。因此,揭示翻譯后修飾的規(guī)律是了解蛋白質(zhì)復(fù)雜性和多樣的生物學(xué)功能的前提,。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾是一個復(fù)雜的過程,。目前,發(fā)現(xiàn)的比較常見的修飾類型是糖基化,、泛素化和磷酸化,。樣品中翻譯后修飾蛋白質(zhì)含量低、動態(tài)范圍廣給相關(guān)研究帶來了很大的挑戰(zhàn),?;诜g后修飾蛋白的異質(zhì)性和相對豐度低的特點,主要利用凝膠,、生物質(zhì)譜和生物信息學(xué)工具對其進(jìn)行研究,。用于PTM分析的質(zhì)譜方法類似于用于“常規(guī)”蛋白質(zhì)鑒定的方法,包括自下而上,、自中而下和自上而下的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,。蛋白質(zhì)修飾可檢測修飾類型有磷酸化、糖基化,、乙?;⒎核鼗?、丙?;⒍□,;?、丙二酰化,。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué):蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行共價加工的過程,。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團(tuán),可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì),,進(jìn)而影響蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象和活性狀態(tài),、亞細(xì)胞定位、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義,,異常的翻譯后修飾會導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。質(zhì)譜可以分辨蛋白質(zhì)修飾前和修飾后分子量上的變化,,因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進(jìn)行鑒定和定量,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的作用主要是改變蛋白質(zhì)的活性。貴陽泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜鑒定

蛋白質(zhì)有哪些翻譯后修飾,?杭州丙二?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析價格

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)技術(shù)優(yōu)點:1、全方面性:磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)以整個細(xì)胞蛋白為研究對象,,研究內(nèi)容包括了細(xì)胞內(nèi)具有生命功能的蛋白,,如細(xì)胞增生、細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化等相關(guān)蛋白,,因而研究更為全方面,。2、可靠性:傳統(tǒng)的生物學(xué)研究蛋白質(zhì)磷酸化往往針對特定條件,,以兩個蛋白或更多蛋白之間的相互作用為出發(fā)點,,具有局限性,缺乏整體認(rèn)識,。磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)則可檢測不同蛋白激酶及磷酸化酶對同一個蛋白磷酸化程度的影響,,因而結(jié)果具有普遍性和可靠性。3,、有效性:磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)反映的是細(xì)胞內(nèi)真實發(fā)生的事件,,在一次試驗中考慮了不同變量,克服了生物學(xué)中逐步添加變量的缺陷,。4,、探索性:磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)以細(xì)胞內(nèi)蛋白為研究對象,相對于傳統(tǒng)的生物學(xué)研究以及蛋白質(zhì)芯片,,更易發(fā)現(xiàn)未知的新磷酸化位點和磷酸化蛋白質(zhì),。如果可以聯(lián)合生物學(xué)技術(shù),則可以發(fā)現(xiàn)具有磷酸化或者去磷酸化功能的酶,。杭州丙二?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析價格

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