翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過程,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯,、乙酸酯、酰胺基或甲基等官能團(tuán)增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,,并影響正常細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)病機(jī)理的幾乎所有方面,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細(xì)胞過程中起著關(guān)鍵作用,如細(xì)胞分化,、蛋白質(zhì)降解,、信號(hào)傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)過程、基因表達(dá)調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,、糖基化、泛素化,、亞硝基化,、甲基化、乙?;?、脂質(zhì)化和蛋白水解,。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點(diǎn))在細(xì)胞生物學(xué)以及疾病診斷和預(yù)防研究中至關(guān)重要,。糖基化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學(xué)主要在復(fù)雜的多細(xì)胞或組織形成過程中起關(guān)鍵作用,。四川蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)領(lǐng)域
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)產(chǎn)品:常規(guī)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究往往只關(guān)注不同生理、病理?xiàng)l件下蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化,。然而,,越來越多的研究發(fā)現(xiàn),許多重要的生命活動(dòng),、疾病發(fā)生不僅與蛋白質(zhì)的豐度相關(guān),,更重要的是被各類蛋白質(zhì)翻譯后修飾所調(diào)控。因此深入研究蛋白質(zhì)翻譯后修飾對(duì)揭示生命活動(dòng)的機(jī)理,、篩選疾病的臨床標(biāo)志物,、鑒定藥物靶點(diǎn)等方面都具有重要意義。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低,、動(dòng)態(tài)范圍廣,,質(zhì)譜分析前需要對(duì)修飾進(jìn)行富集以提高其豐度。杭州琥珀?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)領(lǐng)域蛋白質(zhì)磷酸化修飾的免疫印跡技術(shù)優(yōu)點(diǎn):能夠特異鑒定單個(gè)磷酸化位點(diǎn),。
磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù):蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一。磷酸化修飾本身所具有的簡(jiǎn)單,、靈活,、可逆的特性,以及磷酸基團(tuán)的供體ATP的易得性,,使得磷酸化修飾被真核細(xì)胞所選擇接受成為一種比較普遍的調(diào)控手段,。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程,幾乎調(diào)節(jié)著包括細(xì)胞的增殖,、發(fā)育,、分化、細(xì)胞骨架調(diào)控,、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)活動(dòng),、肌肉收縮,、新陳代謝發(fā)生等生命活動(dòng)的所有過程,并且可逆的蛋白質(zhì)磷酸化是目前所知道的比較主要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式,。目前已經(jīng)知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起,,而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導(dǎo)致的后果。
乙?;揎椀鞍捉M學(xué)介紹:蛋白質(zhì)乙?;?Acetylation)是蛋白在乙?;D(zhuǎn)移酶(或非酶)的催化下,將乙?;鶊F(tuán)轉(zhuǎn)移并添加在蛋白賴氨酸殘基或蛋白N端上的過程,,在調(diào)控蛋白質(zhì)功能、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)中起重要作用,。乙?;揎椫饕譃閮深悾旱鞍譔端的乙酰化修飾和蛋白賴氨酸上的乙?;揎?。N端乙?;揎棿蟛糠职l(fā)生在真核生物的蛋白上,,由N乙酰轉(zhuǎn)移酶(NATs)催化;賴氨酸上的乙?;揎検且粋€(gè)可逆的過程,,主要由賴氨酸乙?;?KATs)和賴氨酸去乙酰化酶(KDACs)催化,。蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)具有探索性,。
甲基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)原理:目前用于甲基化蛋白質(zhì)組分析的甲基化肽段富集抗體分為精氨酸甲基化(Me-R)抗體和賴氨酸甲基化(Me-K)抗體兩大類。根據(jù)氨基酸殘基上所含甲基化修飾基團(tuán)數(shù)量的不同,,精氨酸甲基化(Me-R)抗體又包括:?jiǎn)渭谆彼幔∕MA)抗體,、非對(duì)稱二甲基化精氨酸(ADMA)抗體和對(duì)稱二甲基化精氨酸(SDMA)抗體;賴氨酸甲基化(Me-K)抗體又包括:賴氨酸單甲基化(K-Me)抗體,、賴氨酸二甲基化(K-2Me)抗體和賴氨酸三甲基化(K-3Me)抗體,。其中,Me-R的各類抗體需要單獨(dú)使用,,而Me-K抗體可以混合使用,。泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。杭州琥珀?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)領(lǐng)域
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)磷酸化修飾具有靈活的特性,。四川蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)領(lǐng)域
琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組鑒定:蛋白質(zhì)琥珀?;揎検切陆l(fā)現(xiàn)的一種蛋白質(zhì)翻譯后修飾,,是在琥珀酰輔酶 A 的介導(dǎo)下將一個(gè)負(fù)電荷四碳琥珀酰基轉(zhuǎn)移到賴氨酸殘基的伯胺上的過程,。賴氨酸琥珀?;谡婧思?xì)胞及原核細(xì)胞中普遍存在,參與調(diào)控包括三羧酸循環(huán),,氨基酸代謝以及脂肪酸代謝在內(nèi)的多個(gè)代謝信號(hào)通路,。琥珀?;鞍踪|(zhì)組以組織、細(xì)胞等較為復(fù)雜樣本為研究對(duì)象,,目的在于鑒定樣品中發(fā)生琥珀?;揎椀牡鞍踪|(zhì)以及相應(yīng)的琥珀酰化修飾位點(diǎn),。琥珀?;揎椀鞍踪|(zhì)組技術(shù)特點(diǎn):采用主流抗體親和富集方法,特異性高,,富集效率好,。四川蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)領(lǐng)域