RNA-Seq,，是基于新一代測序技術(shù)的轉(zhuǎn)錄組學研究方法：首先提取生物樣品的全部轉(zhuǎn)錄的RNA并進行mRNA富集，然后反轉(zhuǎn)錄為cDNA后進行的新一代高通量測序,，在此基礎上進行片段的拼接組裝,，從而可得到一個個的轉(zhuǎn)錄本，進而可以形成對該生物樣品當前發(fā)育狀態(tài)的基因表達狀況的全局了解,。不同階段或部位的生物樣品的RNA-Seq轉(zhuǎn)錄組進行比較分析,，則可以在轉(zhuǎn)錄層面得到基因表達水平的變化，針對關鍵基因則可以進行代謝通路（Pathway）的構(gòu)建,。轉(zhuǎn)錄組學即特定細胞在某一功能狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA的總和,，包括mRNA和非編碼RNA。RNA-Seq轉(zhuǎn)錄組學即對轉(zhuǎn)錄組進行測序和分析,。深圳全長轉(zhuǎn)錄學組分析鑒定

RNA-Seq轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)優(yōu)勢：相比基因芯片和標記的堿基序列的測序方法,，RNA-seq具有一定的優(yōu)越性。與基因芯片相比,，RNA-Seq不只可以在更高的分辨率下用來測量基因的表達水平情況,，還可以揭示未知的轉(zhuǎn)錄組和拼接亞型，并為選擇性拼接亞型提供定量分析,。轉(zhuǎn)錄組學(Transcriptomics),，是一門在真整體水平上研究細胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學科，從RNA水平研究基因的表達情況,。轉(zhuǎn)錄組測序是通過二代測序平臺快速全方面地獲得某一物種特定細胞或組織在某一狀態(tài)下的幾乎所有的轉(zhuǎn)錄本及基因序列,，可以用來研究基因表達量、基因功能,、結(jié)構(gòu),、可變剪接和預測新的轉(zhuǎn)錄本等等。上海高通量轉(zhuǎn)錄組學方法轉(zhuǎn)錄組學可以直接測定每個轉(zhuǎn)錄本單核苷酸分辨率的準確度,。

circRNA轉(zhuǎn)錄組學：是一類具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA分子,，沒有5′帽子結(jié)構(gòu)和3′poly（A）結(jié)構(gòu),，主要位于細胞質(zhì)或儲存于外泌體中，不受RNA外切酶影響,，表達更穩(wěn)定且不易降解，已被證明普遍存在于多種真核生物體內(nèi)[1],。大多數(shù)circRNA是由外顯子環(huán)化而成,，也有部分circRNA是由內(nèi)含子環(huán)化而成的套索結(jié)構(gòu)。同時由于circRNA含有大量的miRNA應答原件（MREs）,，能與AGO蛋白形成RNA誘導沉默復合體（RISC）的催化關鍵,，然后導致circRNA降解。根據(jù)來源,，circRNA可大致分為四類：全外顯子型的circRNA,，內(nèi)含子和外顯子組合的EIcircRNA，內(nèi)含子組成的套索型ciRNA,，由病毒RNA基因組,、tRNA、rRNA,、snRNA等環(huán)化產(chǎn)生的circRNA,。

全轉(zhuǎn)錄組學測序技術(shù)優(yōu)勢：文庫優(yōu)化：針對不同長度的序列采用兩種文庫構(gòu)建方法，采用去核糖體的鏈特異性文庫可以獲得mRNA,、lncRNA和circRNA的序列信息,。數(shù)據(jù)全：全轉(zhuǎn)錄組測序完成后可獲取4類主要RNA（miRNA，mRNA,，lncRNA,，circRNA）數(shù)據(jù)，可對這些數(shù)據(jù)進行標準分析及整合分析,。關聯(lián)全：通過對mRNA/miRNA/lncRNA/circRN序列測定及后續(xù)分析,，深入開展全轉(zhuǎn)錄組調(diào)控網(wǎng)絡(ceRNA網(wǎng)絡)分析。樣本類型：細胞,，組織,，體液、血清,、血漿,、全血，總RNA等,。建議總RNA起始量：＞15μg,，濃度≥200ng/μL）。狹義上轉(zhuǎn)錄組學的指所有mRNA的組合。

單細胞轉(zhuǎn)錄組關鍵步驟：單細胞的分離和捕獲：溫和分離,，稀有細胞,。轉(zhuǎn)錄本的捕獲和擴增：RNA測序需要0.1-1.0ugtotalRNA，捕獲效率10%（5-**NA測序需要1ngDNA,，極限稀釋加移液分離單細胞,；顯微操作分選單細胞；流式分選帶有表面Marker的單細胞,；激光切割實體組織,；微流控技術(shù)；磁珠捕獲,，主要用于CTC,。它的一個優(yōu)點是可以結(jié)合流式細胞熒光分選（FACS,fluorescentactivatedcellsorting）根據(jù)表面Marker分選細胞。因此特別適合分選細胞子集用于測序,。它的另一個優(yōu)點是可以獲得細胞形態(tài)全覽圖,，提供另外一個維度的信息，可用于鑒定微孔中是否有損傷的細胞或雙份細胞,，主要缺點是通量低且每個細胞所需的工作量相當大,。轉(zhuǎn)錄組學能夠同時鑒定和定量稀有轉(zhuǎn)錄本和正常轉(zhuǎn)錄本,。上海高通量轉(zhuǎn)錄組學方法

普通轉(zhuǎn)錄組測序主要適用于不同的環(huán)境,、藥物、病原菌等逆境脅迫處理,。深圳全長轉(zhuǎn)錄學組分析鑒定

商務服務屬于現(xiàn)代服務業(yè)的范疇,，是指為企業(yè)提供服務的行業(yè)劃分。商務服務行業(yè)門類較多,，新產(chǎn)業(yè)不斷涌現(xiàn),，給產(chǎn)業(yè)的界定和使用造成很多混亂。銷售既可以把我們從書本上得來的知識學以致用,，還能在物換星移的時空里激發(fā)我們對生命和世界的熱愛,。正如銘刻在希臘圣城德爾斐神殿上的出名箴言——“人啊，認識你自己”,，在旅途中看到自己的內(nèi)心,，生命也因此而豐盛。在文創(chuàng)產(chǎn)品方面,，服務型企業(yè)是蘊含著傳統(tǒng)文化基因的禮物是文化服務,，是中國及世界精神文明的象征。所以對于行業(yè)內(nèi)的無數(shù)企業(yè)來說,，這不僅是一個巨大商機,，更是一個發(fā)展前景。嚴格來說，無論是欣賞人文還是享受山水之樂,，都離不開良好的有限責任公司（自然）服務,，好的有限責任公司（自然）服務總能讓人身心愉悅，更好地融入當?shù)厣?，?chuàng)造出旅游記憶,。深圳全長轉(zhuǎn)錄學組分析鑒定