蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要性：翻譯后修飾可以發(fā)生在蛋白質(zhì)生命周期的任何階段,。例如,，許多蛋白質(zhì)在翻譯完成后不久就被修飾,，以介導(dǎo)適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊或穩(wěn)定,，或?qū)⑿律鞍踪|(zhì)引導(dǎo)到不同的細(xì)胞區(qū)室（例如,，細(xì)胞核,、膜）,。折疊和定位完成后發(fā)生其他修飾,，以刺激或滅活催化活性或以其他方式影響蛋白質(zhì)的生物活性,。蛋白質(zhì)也與靶向降解蛋白質(zhì)的標(biāo)簽共價(jià)連接,。除了單一的修飾外，蛋白質(zhì)通常還通過(guò)翻譯后切割和通過(guò)蛋白質(zhì)成熟的分步機(jī)制增加功能基團(tuán)的組合進(jìn)行修飾,。分析蛋白質(zhì)及其翻譯后修飾對(duì)于心臟病,、神經(jīng)退行性疾病和糖尿病的研究尤為重要。PTMs 的特征,，雖然具有挑戰(zhàn)性,，但提供了對(duì)病因?qū)W過(guò)程下的細(xì)胞功能的無(wú)價(jià)的洞察。在技術(shù)上,，研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開發(fā)特異性的檢測(cè)和純化方法,。幸運(yùn)的是，這些技術(shù)障礙正在用各種新的和精煉的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)來(lái)克服,。乙?；揎棇?duì)細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的刺激有著非常重要的作用。山東蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)分析

乙?；揎椀鞍捉M學(xué)應(yīng)用方向：1,、乙?；揎椗c細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、表觀調(diào)控,、細(xì)胞凋亡,、細(xì)胞代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性等生理過(guò)程研究,。2、乙?；鸬拇x疾病,、代謝紊亂發(fā)生等疾病機(jī)理研究。乙?；飳W(xué)意義：1、調(diào)節(jié)DNA-蛋白,、蛋白-蛋白相互作用,；2、與其他PTMs發(fā)生crosstalk,；3,、調(diào)節(jié)酶活性；4,、調(diào)控蛋白亞細(xì)胞定位,。生物領(lǐng)域各個(gè)研究方面，如：1,、農(nóng)林領(lǐng)域：抗逆脅迫機(jī)制,，生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制，育種保護(hù)研究等,；2,、 畜牧業(yè)：肉類及乳品質(zhì)研究，致病機(jī)理研究等,。上海甲基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究乙?；揎検求w內(nèi)高度保守的可逆轉(zhuǎn)的蛋白修飾。

蛋白質(zhì)的甲基化修飾 ：蛋白質(zhì)的甲基化（methylation）是指將甲基酶促轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)的某個(gè)殘基上,，通常是賴氨酸或精氨酸,，也包括組氨酸、半胱氨酸和天冬酰胺等,。蛋白質(zhì)的甲基化是一種普遍的修飾,，在大鼠肝細(xì)胞核的總蛋白提取物中，大約2％的精氨酸殘基是二甲基化的,。蛋白質(zhì)甲基化經(jīng)常與乙?；⒘?，因?yàn)樗鼈兌际浅Ｒ姷谋碛^遺傳修飾，經(jīng)常發(fā)生在組蛋白上,。不過(guò)從化學(xué)反應(yīng)的角度來(lái)看,，乙酰化可以算作一種短鏈脂?；揎?，這里主要討論甲基化方面的問(wèn)題。

泛素化修飾蛋白質(zhì)組技術(shù)原理：首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,，然后使用液相色譜對(duì)酶解后的肽段混合物進(jìn)行組分分離以降低樣本復(fù)雜程度,，然后通過(guò)高質(zhì)量的泛素化修飾類抗體和生物材料對(duì)修飾肽段進(jìn)行富集，之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜中進(jìn)行分析定量,。技術(shù)優(yōu)勢(shì)：1,、高特異性的修飾類泛抗體；2,、高分辨率,、高靈敏度質(zhì)譜儀；應(yīng)用領(lǐng)域：泛素化修飾還參與了細(xì)胞周期,、增殖,、細(xì)胞凋亡、分化,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),、信號(hào)傳遞,、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)的調(diào)控,。泛素化心血管等疾病的發(fā)病密切相關(guān),。因此，作為近年來(lái)生物化學(xué)研究的一個(gè)重大成果,，它已然成為研究,、開發(fā)新藥物的新靶點(diǎn)。蛋白質(zhì)磷酸化修飾的免疫印跡技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：能夠特異鑒定單個(gè)磷酸化位點(diǎn),。

泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)樣品要求：1,、動(dòng)物組織的樣品量濕重不少于200mg。2,、植物細(xì)菌,、噬菌體等微生物類樣品量濕重不少于2g。3,、富含雜質(zhì)或蛋白質(zhì)含量低的樣品量濕重不少于5g,；如植物的根,，木質(zhì)部、韌皮部組織等,。4,、體液類（唾液、羊水,、腦脊液等）10mL以上,，要保證不能溶血；血清要求500μl以上,；尿液要求50mL以上,。5、如直接提供蛋白質(zhì)提取物,，濃度不少于2 mg/mL,，總量不少于1 mg。為保證實(shí)驗(yàn)效果,，請(qǐng)盡量告知緩沖液成分,，如是否有硫脲、SDS,、強(qiáng)離子鹽等等。另樣品中應(yīng)不含核酸,、脂類,、多糖等影響分離效果的成分。6,、在細(xì)胞器蛋白質(zhì)組學(xué)方面,，提取細(xì)胞器或亞細(xì)胞器后，蛋白沉淀量在1 mg以上,。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾調(diào)控著底物的酶活性,、功能以及三級(jí)結(jié)構(gòu)的變化。蛋白質(zhì)丙二?；揎椊M學(xué)主要技術(shù)

泛素化修飾蛋白質(zhì)組可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,。山東蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)分析

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)：是植物體內(nèi)比較常見的PTM修飾手段。它是指通過(guò)蛋白激酶和磷酸酶的作用在特定絲氨酸,、蘇氨酸和酪氨酸的羥基上添加或去除一個(gè)或多個(gè)磷酸基團(tuán),，進(jìn)而有效地改變底物蛋白的結(jié)構(gòu)和活性。在植物體內(nèi)主要參與植物溫度脅迫,、鹽脅迫,、干旱脅迫、養(yǎng)分脅迫調(diào)控等大多數(shù)代謝和生理途徑,。蛋白質(zhì)磷酸化對(duì)于許多生物現(xiàn)象的引發(fā)是很必要的,，包括細(xì)胞生長(zhǎng),、增殖、泛素（ubiquitin）介導(dǎo)的蛋白降解等過(guò)程,。特別是酪氨酸磷酸化,，作為細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和酶活性調(diào)控的一種主要方式，通常通過(guò)引發(fā)蛋白質(zhì)之間的相互作用,，進(jìn)而介導(dǎo)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子等對(duì)細(xì)胞膜上受體的信號(hào)調(diào)控,。山東蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)分析