轉(zhuǎn)錄組學(xué)的作用:轉(zhuǎn)錄組測序可以對(duì)所有轉(zhuǎn)錄物進(jìn)行分類,、確定基因的轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)、量化轉(zhuǎn)錄物的表達(dá)水平,。蛋白質(zhì)是生命功能的直接執(zhí)行者,,蛋白組是一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。整合轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的表達(dá)數(shù)據(jù)對(duì)生物樣本進(jìn)行研究,,可以從整體上解釋生物學(xué)問題,,探究生物體生理和疾病機(jī)理等。轉(zhuǎn)錄組學(xué)應(yīng)用于胃腸瘤發(fā)生機(jī)制研究:利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)可檢測瘤細(xì)胞惡化過程中的RNA(編碼RNA及非編碼RNA)的變化,,有助于更好地理解胃腸瘤的發(fā)生機(jī)制,。circRNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)或外泌體中,具有組織特異性,、疾病特異性,、時(shí)序特異性及高穩(wěn)定性等特征。江蘇RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)費(fèi)用
全長轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序:由于在轉(zhuǎn)錄組研究中通常所使用的第二代測序技術(shù)具有測序讀長的限制,,因此在進(jìn)行測序之前,,需要先將樣本的mRNA打碎為小片段,之后再通過與參考基因組比對(duì)或拼接的方式識(shí)別轉(zhuǎn)錄本,,這就會(huì)造成一定的錯(cuò)誤比例,,同時(shí)在也很難區(qū)分單堿基水平的差異,。全長轉(zhuǎn)錄組測序的優(yōu)勢(shì):1,、全方面鑒定可變剪切;2,、發(fā)現(xiàn)更多新基因,;3、有效改善基因組注釋,;4,、鑒定更多的LncRNA;5,、準(zhǔn)確定位融合基因,。研究思路:由于全長轉(zhuǎn)錄組測序是基于第三代測序技術(shù),因而其成本依然較高,,如果全部研究項(xiàng)目均基于全長轉(zhuǎn)錄組,,通常來說很難承擔(dān),因此,,全長轉(zhuǎn)錄組測序一般與普通轉(zhuǎn)錄組測序相結(jié)合,。貴陽全轉(zhuǎn)錄學(xué)組應(yīng)用轉(zhuǎn)錄組學(xué)可以對(duì)任意物種進(jìn)行全基因組分析。
什么叫轉(zhuǎn)錄組學(xué)?廣義轉(zhuǎn)錄組是指生命單元(通常是一種細(xì)胞)中所有按基因信息單元轉(zhuǎn)錄和加工的RNA分子(包括編碼和非編碼RNA功能單元),或者是一個(gè)特定細(xì)胞所有轉(zhuǎn)錄本的總和.它的研究對(duì)象就是這些RNA與蛋白質(zhì)分子和它們所組成的基因功能網(wǎng)絡(luò)以及它們與細(xì)胞功能的關(guān)系.而狹義轉(zhuǎn)錄組是指可直接參與翻譯蛋白質(zhì)的mRNA總和.研究生物細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄組的發(fā)生和變化規(guī)律的科學(xué)就稱為轉(zhuǎn)錄組學(xué)(tran—scriptomics),。轉(zhuǎn)錄組學(xué)即特定細(xì)胞在某一功能狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA的總和,,包括mRNA和非編碼RNA。
轉(zhuǎn)錄組學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域:農(nóng)林領(lǐng)域:生長發(fā)育機(jī)制,,抗逆脅迫機(jī)制,,育種,物種保護(hù)研究等,;畜牧業(yè):生長發(fā)育機(jī)制,,致病機(jī)理研究,肉類及乳制品品質(zhì)研究等,;海洋水產(chǎn):生長發(fā)育機(jī)制,,漁業(yè)資源,漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等,;微生物:致病機(jī)理,,耐藥機(jī)制,病原體-宿主相互作用研究等,;生物醫(yī)藥:生物標(biāo)志物,,疾病機(jī)理機(jī)制,疾病分型,,藥物開發(fā),,個(gè)性化醫(yī)治等;環(huán)境科學(xué):發(fā)酵過程優(yōu)化,,生物燃料生產(chǎn),,環(huán)境危害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估研究等;食品科學(xué):食品儲(chǔ)藏及加工條件優(yōu)化,,食品組分及品質(zhì)鑒定,,功能性食品開發(fā),食品安全監(jiān)檢測等,。普通轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序適用于哪些情況,?
circRNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)成環(huán)機(jī)制:circRNA環(huán)化方式分為內(nèi)含子環(huán)化和外顯子環(huán)化。目前主流的成環(huán)機(jī)制可歸類為:依賴于剪切體的索尾插接環(huán)化,。在mRNA前體上,,通過連續(xù)的組裝小核核糖體蛋白從而催化外顯子下游的5′供體的位點(diǎn)連接到上游的3′受體的位點(diǎn),索尾插接形成環(huán)化,,然后通過剪切形成circRNA,。順式作用元件促進(jìn)circRNA形成。部分circRNA外顯子兩側(cè)的內(nèi)含子中含有反向互補(bǔ)序列,,首先在剪切位點(diǎn)上并排形成RNA雙鏈體,,再通過可變剪切形成帶內(nèi)含子和不帶內(nèi)含子兩種不同的circRNA,。或者外顯子內(nèi)部以及兩側(cè)的內(nèi)含子可以競爭進(jìn)行RNA配對(duì),,然后通過可變剪切形成不同類型的circRNA,。宏轉(zhuǎn)錄組學(xué)能有效的擴(kuò)展微生物資源的利用空間。江蘇RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)費(fèi)用
轉(zhuǎn)錄學(xué)組測序是目前深入研究轉(zhuǎn)錄組復(fù)雜性的強(qiáng)大工具,。江蘇RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)費(fèi)用
轉(zhuǎn)錄組學(xué)差異基因數(shù)目多少比較合理,?不同的處理,不同的研究目標(biāo),,差異基因的數(shù)目是不同的,,從幾十個(gè)到幾千個(gè)都有可能。但是如果差異基因數(shù)目是個(gè)位數(shù)或者上萬,,那么就需要和分析人員溝通一下,,查一查是否有問題。轉(zhuǎn)錄組學(xué)差異基因太多,,注釋信息太雜亂,,怎么挑選目標(biāo)基因?對(duì)不同的差異組合進(jìn)行維恩圖分析,,挑選共有或者特有的差異基因作為后續(xù)的研究對(duì)象,;根據(jù)前人的文獻(xiàn)報(bào)道,挑選相關(guān)差異基因,,不要局限在自己研究的物種上,。單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù): Anydeplete技術(shù)首先通過隨機(jī)引物進(jìn)行一鏈合成,一鏈合成引入核苷酸類似物,,用于酶切打斷,,二鏈合成同樣引入核苷酸類似物用于保證鏈特異性。然后兩端加上接頭,,接頭一條鏈也帶有核苷酸類似物,,用于酶切降解。當(dāng)形成單鏈文庫后,,設(shè)計(jì)特異性引物與rRNA形成文庫結(jié)合,一輪退火延伸,,rRNA文庫形成雙鏈結(jié)構(gòu),。江蘇RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)費(fèi)用