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天津轉(zhuǎn)染試劑如何使用

來源: 發(fā)布時間:2021-05-21

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。

4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成,; 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,,直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.天津轉(zhuǎn)染試劑如何使用

用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染 24 小時后,,細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。

對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/

30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑,、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),,用量為 LipoD293? 試劑,,20 微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 吉林bi 轉(zhuǎn)染試劑riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,***靠譜!

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞,。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,,以此來評價轉(zhuǎn)染效率,。

對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較


在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)






用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染24小時后,,細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑,、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),,用量為LipoD293?試劑,,20微克,,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細(xì)胞.

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,,沒有細(xì)微污染,,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦,!

載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),,當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒,、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 轉(zhuǎn)染后6h觀察細(xì)胞狀態(tài),,并更換培養(yǎng)基,,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞,,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提,。加多少轉(zhuǎn)染試劑

并更換培養(yǎng)基,,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞,,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提,。天津轉(zhuǎn)染試劑如何使用

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便,、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力天津轉(zhuǎn)染試劑如何使用