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血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的大淡黃色透明液體,,或者纖維蛋白原已經(jīng)被除去的血漿,。其主要作用是,提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),,提供***和各種生長(zhǎng)因子,,提供結(jié)合蛋白,提供促接觸和生長(zhǎng)因子,,使細(xì)胞貼壁,,免受機(jī)械損傷,對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用,。血清的成分非常復(fù)雜,,雖然現(xiàn)在已經(jīng)明白其中大部分成分,,但是還有相當(dāng)多的成分還不清楚。要認(rèn)識(shí)血清,,首先要明確全血和血漿的概念,。全血包括血細(xì)胞和血漿,血漿是全血除了血細(xì)胞外的淡黃色液體,,包括水,、白蛋白,、球蛋白,、電解質(zhì)、各種凝血因子等,,當(dāng)全血中加入抗凝劑,,經(jīng)離心后除去血細(xì)胞即可分離獲得血漿。而血清為全血自然凝固(凝血系統(tǒng)***)形成血凝塊后析出的淡黃色液體,,雖然肉眼觀與血漿沒(méi)有什么區(qū)別,,但二者所含成分不同,主要區(qū)別在于血清不含纖維蛋白原,。細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位,。像生物體那樣,也以經(jīng)過(guò)生長(zhǎng),、發(fā)育,、衰老等這幾個(gè)階段。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)
上海儒安生物科技有限公司麗春紅染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介:1.麗春紅(PonceauS)染色液可以用于PVDF膜,、硝酸纖維素膜(nitrocellulosemembrane)和醋酸纖維素膜(celluloseacetatemembrane)上的蛋白的檢測(cè),。麗春紅帶負(fù)電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合,,同時(shí)麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合,,從而形成紅色的條帶。2.麗春紅對(duì)蛋白的染色是可逆的,,染色后可以用蒸餾水,,PBS或其它適當(dāng)溶液洗去。3.本試劑盒使用方便,,本底低,,靈敏度較高,對(duì)蛋白的檢測(cè)下限是250納克,。使用方法:1.將PVDF膜,、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒(méi)在麗春紅染色液中,搖動(dòng)3-5分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,,直至出現(xiàn)清晰條帶,。對(duì)結(jié)果作適當(dāng)記錄,。2.用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次,,每次3-5分鐘,,去除麗春紅,進(jìn)行后續(xù)的Western檢測(cè),。edu細(xì)胞增殖試劑盒細(xì)胞的增殖,,增殖的含義是指什么?
Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開(kāi)發(fā)的檢測(cè)細(xì)胞增殖,、細(xì)胞毒性的試劑盒,,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開(kāi)發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,,在日本,,美國(guó),歐洲等國(guó)家地區(qū)均持有**,,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國(guó)獲得了WST-8的注冊(cè)商標(biāo),。
CCK-8法與普通的MTT法相比,具有特點(diǎn):
★靈敏度高,,數(shù)據(jù)可靠,,重現(xiàn)性好
★操作簡(jiǎn)便,省時(shí)省力
★水溶性,,不需要換液,,尤其適合于懸浮細(xì)胞
★無(wú)需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對(duì)細(xì)胞毒性低
★為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,,即開(kāi)即用
★適合于高通量篩選
CCK-8用途:篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定,、細(xì)胞毒性測(cè)定,、藥敏試驗(yàn)
CCK-8試劑盒在國(guó)內(nèi)**科研院所、重點(diǎn)大學(xué),、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,,國(guó)際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,,比較高IF26.5分。
Q:CCK-8能否用于細(xì)胞染色,?
A:CCK-8不能用于細(xì)胞染色,,CCK-8檢測(cè)原理是高水溶性的四唑鹽WST-8在電子耦合試劑存在下還原產(chǎn)生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,,不會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,。
Q:沒(méi)有450 nm的濾光片,,能否使用其他濾光片?
A:如果您沒(méi)有450 nm濾光片,。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之間的濾光片, 450 nm濾光片具有比較好靈敏度,。
Q:哪些物質(zhì)會(huì)干擾CCK-8的測(cè)定?
A:WST-8可能與還原劑反應(yīng)生成WST-8 formazan,,如果使用還原劑(例如一些抗氧化劑)會(huì)增加OD值,;若存在氧化性物質(zhì)則會(huì)阻擋CCK-8測(cè)定反應(yīng),減小OD值,;此外,,培養(yǎng)基中的酚紅不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí),,通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去,。 研究對(duì)控制細(xì)胞周期進(jìn)程的主要檢驗(yàn)點(diǎn)相關(guān)的周期蛋白與依賴(lài)于周期蛋白的激酶的調(diào)控機(jī)理,。
上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析,。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye),。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途:***篩選,、細(xì)胞增殖測(cè)定,、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)CCK8的優(yōu)點(diǎn):使用方便,,省去了洗滌細(xì)胞,,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;CCK-8法能快速檢測(cè),;CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度;CCK-8法的重復(fù)性?xún)?yōu)于MTT法,;CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性?。籆CK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,,即開(kāi)即用。CCK8的缺點(diǎn):與MTT法相比,,CCK8和XTT的價(jià)格比較貴,。CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,,不注意的話(huà)容易產(chǎn)生漏加或多加,。與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比較:檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差,。CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,,即開(kāi)即用,。天津精原細(xì)胞增殖檢測(cè)
CCK8的實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)分組及檢測(cè)方法,。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)
抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,,二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事項(xiàng) 1.為獲得比較好效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床;  2.將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào);  3.不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;  4.避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子;  5.所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡,銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測(cè)
上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號(hào)2幢J1718室,,交通便利,,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè),。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),,隨著市場(chǎng)的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn),,追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時(shí),,良好的質(zhì)量、合理的價(jià)格,、完善的服務(wù),,在業(yè)界受到寬泛好評(píng)。公司始終堅(jiān)持客戶(hù)需求優(yōu)先的原則,,致力于提供高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體,。上海儒安生物科技自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化,、專(zhuān)業(yè)化路線(xiàn),,得到了廣大客戶(hù)及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。