簡介:X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系,。優(yōu)勢:
1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,,室溫穩(wěn)定,。
2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。
3.使用細胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關(guān)性好。
圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP,,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)),。 賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染,。上海常用轉(zhuǎn)染試劑作用
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,。因此,,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),,且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。 上海細胞轉(zhuǎn)染試劑價格無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,。
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑 簡介:
X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細胞分析的多種實驗。
優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù)。
2.操作簡便,、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。
3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。
細胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞了,轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,,那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關(guān)重要了,!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K,!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強大,,值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,,能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達,。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑,,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,,使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達40%左右,。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,小鼠體內(nèi)靶向效率達到10000倍,,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍,。世界上低價的細胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細的操作步驟!
羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn),。
兩種試劑對CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較,,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性
不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,,X-tremeGENE HP 試劑遠優(yōu)于其他試劑
超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證
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MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海常用轉(zhuǎn)染試劑作用
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。
4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。
LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程
細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。 上海常用轉(zhuǎn)染試劑作用