細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑,，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,，然后封裝于玻璃小瓶中,，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便,、節(jié)省時(shí)間,，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可),。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,靠譜!動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年,，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品,，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng),，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù),、電子技術(shù),、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案,，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。隨后，開(kāi)拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品,，使組織除了石蠟包埋外,，還能夠包埋在塑料塊中；開(kāi)發(fā)染料和染色劑,，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式,。與****合作，開(kāi)發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球,。與美國(guó)國(guó)家**中心合作,，開(kāi)發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開(kāi)發(fā)出超順磁珠,，用于DNA,、蛋白質(zhì)和肽的研究。DNA轉(zhuǎn)染試劑原理驚艷登場(chǎng)!臨床級(jí)載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑,。

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系）,，且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。

在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。2.高靈活應(yīng)用,，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn),。3.細(xì)胞毒性低,，結(jié)果相關(guān)性好,，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基),。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程,，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。通過(guò)LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。每孔培養(yǎng)體積均為100μL，細(xì)胞數(shù)目在105左右,。

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑 LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：高轉(zhuǎn)染效率,，適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無(wú)需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無(wú)需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基

1轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細(xì)胞系圖1. LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見(jiàn)細(xì)胞系,，通過(guò)檢測(cè)GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率,。

2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性,。 CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?上海體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑報(bào)價(jià)

轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型可簡(jiǎn)單分為兩大類(lèi),，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。

4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍,。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性,。 動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制