十全十美難，十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,，細胞毒性低,，操作簡單可重復,，價格還要可愛。現(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑，但脂質(zhì)體對細胞毒性大，某些細胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,，看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,，脂質(zhì)體的劣勢較明顯,。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領域的研發(fā)思路與其核酸純化領域的精而專，全而深不同,。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,，另辟蹊徑，研精致思進而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,，神奇的開辟出一塊藍海，為客戶烹制出了幾款高效,、快速,、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中,，前后移動培養(yǎng)皿,，混合均勻；上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑公司

轉(zhuǎn)染是將外源核酸導入真核細胞的過程,，是細胞和分子生物學研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物領域的科研黨們繞不開的話題,。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細胞換液了",，真所謂辛辛苦苦實驗N多回，一夜回到解放前……眾所周知,，影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,，包括細胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量,、微生物污染,、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,，現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案,。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑作用轉(zhuǎn)染試劑快速查找工具上線!

羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,，升級版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,，在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,，尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,，B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,，X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~

.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%,。

2.高靈活應用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗,。

3.細胞毒性低,，結(jié)果相關性好，確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導,。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗,。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞,。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細胞時,，實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性,。

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。 RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進,、高效的siRNA輸送解決方案,。上海昆蟲細胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

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胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！,！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好,，沒有細微污染,，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦,！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng),、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng),！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒,、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構(gòu)建純化良好,，質(zhì)粒間比例得當,，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑公司