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上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

來源: 發(fā)布時間:2022-05-21

簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,,室溫穩(wěn)定,。2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP,,導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,靠譜!上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%,。2.高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn),。3.細(xì)胞毒性低,,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo),。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成; 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,,直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡介:

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。

優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。

2.操作簡便,、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。

3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力的優(yōu)化工作。

對CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞,。在轉(zhuǎn)染24小時后,,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測器測定;GFP陽性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測,。左圖:LipoD293試劑(升級版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價格比較(美元/1000微升),。所有的價格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理,。

圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進(jìn)行血液化學(xué)分析,。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2,、24及48小時收集血液樣品,,并通過臨床化學(xué)檢測方法對數(shù)個生物標(biāo)志物(Antech)進(jìn)行評估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異,。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染每孔培養(yǎng)體積均為100μL,,細(xì)胞數(shù)目在105左右,。腺病毒轉(zhuǎn)染試劑購買

從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑,、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品,單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng),,所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)(顯微技術(shù)),、生物技術(shù)、電子技術(shù),、護(hù)理及制藥工程等多個領(lǐng)域,。起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域,。隨后,,開拓了在病理(組織研究)應(yīng)用產(chǎn)品,使組織除了石蠟包埋外,,還能夠包埋在塑料塊中,;開發(fā)染料和染色劑,以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測方式,。與****合作,,開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國國家**中心合作,,開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,,并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開發(fā)出超順磁珠,,用于DNA,、蛋白質(zhì)和肽的研究。上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

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