對CHO細胞轉染效率的比較右圖：使用以上轉染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產商的提供的轉染步驟分別轉染到CHO細胞,。在轉染24小時后,，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學發(fā)光監(jiān)測器測定；GFP陽性細胞率使用BD公司的FACS檢測,。左圖：LipoD293試劑（升級版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的價格比較（美元/1000微升）,。所有的價格是從生產制造商的網站上收集對CHO細胞轉染效率的比較右圖：使用以上轉染試劑將編碼熒國產轉染試劑制作原理是什么?動物體內轉染試劑選購

對 HepG2 細胞轉染效率的比較

右圖：使用以上轉染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產商的提供的轉染步驟轉染到 HepG2 細胞（在膠原預處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）。在轉染 48 小時之后,，用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞（%）和熒光強度,。

左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級版）對在 HepG2 細胞的轉染效率。通過三種不同的條件下轉染 HepG2 細胞（生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無血清和***,，10% 血清和***的存在,，轉染 5 小時后換液和不換液。

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原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,。因此,，它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉染,。在經過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系）,，且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,，從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代,。

X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中,，經0.2μm濾膜過濾,，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗,。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低,、轉染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數據,。2.操作簡便,、節(jié)省時間,，只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋，再與質粒DNA共同孵育,，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可),。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA,、mimic,、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉染試劑,。

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應的敲低現象,。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測）,。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應,。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復合物后分別以1、0.5,、及0.25mg/kg的劑量進行注射,。在第2、5,、9,、16、23及30日收集血清,，并使用顯色法對血清進行分析以確定FVII蛋白的敲低效果,。低毒性siRNA脫靶效應會導致細胞死亡，并引起分析問題,。pei轉染試劑原理

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.動物體內轉染試劑選購

用LipoFectMax?轉染Hela細胞,，左圖轉染GFP cDNA，右圖共轉染GFP CDNA和GFP靶向siRNA,。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經細胞的轉染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉染24小時后觀察轉染效果,，LipoFectMax? 轉染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉染試劑轉染試劑操作流程

細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,，通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。 動物體內轉染試劑選購

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