用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染 24 小時后,,細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑,、293fectin,、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),,用量為 LipoD293? 試劑,,20 微克,,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA,。 用于基因編輯的RNP轉(zhuǎn)染試劑.上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑公司
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似,。但相對于連續(xù)細(xì)胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),,且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,,混合均勻,;
.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應(yīng)用,, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn),。
3.細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo),。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn),。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。
超級好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,,這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應(yīng),,正是這一產(chǎn)品的精髓所在,。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染,,滿足miRNA功能分析的需要,。操作簡單,方便快速:HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的,,甚至***之內(nèi)可以完成再次接種,、轉(zhuǎn)染到檢測結(jié)果!這對于高通量反應(yīng)簡直是求之不得的福音:轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,,在37度培養(yǎng)箱中保溫,。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具.
將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER,、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(DP3321,、DP7857)中,48h后,,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32%,、49.71%和43.64%,,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21%,、47.46%和46.31%,。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,,與原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)48h,。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1,、p-SYK,、SYK、CARD9,、p-p65和NLRP3的上調(diào),。所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細(xì)胞.細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好
在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑公司
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑 簡介:
X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。
優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。
2.操作簡便,、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。
3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時費(fèi)力的優(yōu)化工作。 上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑公司
上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號2幢J1718室,,交通便利,,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè),。上海儒安生物科技是一家有限責(zé)任公司企業(yè),,一直“以人為本,服務(wù)于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽(yù),,持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針,。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等多項(xiàng)業(yè)務(wù),。上海儒安生物科技自成立以來,,一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認(rèn)可與大力支持,。