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蛋白轉(zhuǎn)染試劑哪種好

來源: 發(fā)布時間:2022-06-01

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,,RNA等導入細胞內(nèi)的技術(shù),。隨著分子生物學的發(fā)展,,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細胞基因功能、實現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具,。市場上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目,,各有千秋,然而沒有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細胞種類,、滿足所有實驗需求和目的,,成分控認為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機理對轉(zhuǎn)染效果及細胞生理作用影響***,是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù),,選試劑時要留意成分哦,。嚴格來講,轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學法,、物理法(電穿孔,、顯微注射等)以及***介導法,沒有一種方法是放之四海而皆準,。作為成分控的小編,,本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學法轉(zhuǎn)染。siRNA脫靶效應會導致細胞死亡,,并引起分析問題,。蛋白轉(zhuǎn)染試劑哪種好

在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應用,,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗,。3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,,確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導,。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗,。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞,。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。上海動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.

細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡介:

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細胞分析的多種實驗。

優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù),。

2.操作簡便、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可),。

3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作,。

簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系,。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,,室溫穩(wěn)定,。2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。3.使用細胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)...采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細胞時,,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。

基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,,并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,,前者細胞毒性相對較大,,后者細胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,,可謂魚和熊掌不可兼得也,。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,,混合了不同配方的脂類(非脂質(zhì)體),、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,,且操作更加簡單,,易于高通量。細胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.蛋白轉(zhuǎn)染試劑哪種好

將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中,,前后移動培養(yǎng)皿,,混合均勻;蛋白轉(zhuǎn)染試劑哪種好

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率,。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。蛋白轉(zhuǎn)染試劑哪種好

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