用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉(zhuǎn)染24小時后,,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin,、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細胞表達,,用量為LipoD293?試劑,20微克,,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA,。世界上低價的細胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細的操作步驟!上海體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑購買
轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細胞的過程,是細胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的話題,。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,,一夜回到解放前……眾所周知,,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,包括細胞質(zhì)量,、核酸質(zhì)量,、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等,。各種細胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑對照給你選擇CycloFect轉(zhuǎn)染試劑的五大理由!
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系,。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定,。2.高轉(zhuǎn)染效率,,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關(guān)性好,。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,,導(dǎo)致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))...
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.
原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,。因此,,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),,且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。 .0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min),、稀釋,、及注射即可。非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑選購
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用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。
4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。
LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程
細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。 上海體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑購買
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