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上海蛋白轉染試劑選購

來源: 發(fā)布時間:2022-06-15

細胞轉染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉染試劑   簡介:

X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細胞分析的多種實驗,。

優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。

2.操作簡便,、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑進行簡單稀釋,,再與質粒DNA共同孵育,,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。

3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作,。 帶你了解性價比比較高的轉染試劑-PEI轉染.上海蛋白轉染試劑選購

LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),,并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉染,。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合,。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率,。上海polviet轉染試劑作用并更換培養(yǎng)基,,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,,以備RNA抽提,。

基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,,并通過內(nèi)吞作用進入細胞,。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,,后者細胞毒性較小,,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范,。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,不局限于單一成分,,混合了不同配方的脂類(非脂質體),、加上蛋白質組分、以及各種的成分,,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,,且操作更加簡單,易于高通量,。

LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,,通過檢測GFP信號比較轉染效率,。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性,。轉染試劑快速查找工具上線!

基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,,并通過內(nèi)吞作用進入細胞,。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,,后者細胞毒性較小,,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范,。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,,不局限于單一成分,,混合了不同 配方的脂類(非脂質體)、加上蛋白質組分,、以及各種的 成分,,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,,易于高通量,。臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉染試劑..上海Opti-MEM轉染試劑購買

隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。上海蛋白轉染試劑選購

.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%,。

2.高靈活應用,, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。

3.細胞毒性低,,結果相關性好,,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導,。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗,。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞,。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。 上海蛋白轉染試劑選購

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