圖7.對(duì)注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進(jìn)行血液化學(xué)分析,。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi),。在注射后2,、24及48小時(shí)收集血液樣品，并通過臨床化學(xué)檢測方法對(duì)數(shù)個(gè)生物標(biāo)志物(Antech)進(jìn)行評(píng)估,。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異,。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,，Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能,，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑分裝

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%,。

高靈活應(yīng)用,， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。

細(xì)胞毒性低,，結(jié)果相關(guān)性好,，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。

兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 上海電轉(zhuǎn)染試劑配制并更換培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞，用PBS洗滌3次以上,，以備RNA抽提,。

X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2μm濾膜過濾,，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。優(yōu)勢：1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便,、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,，再與質(zhì)粒DNA共同孵育,，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性,。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí),，實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實(shí)驗(yàn)方案,，易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑，可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,，使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果,。世界上低價(jià)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了,，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時(shí)就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價(jià)比超高的轉(zhuǎn)染試劑,，美國Polysciences家的PEIMAX40K,！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強(qiáng)大，值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑,。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑,，以獲得他們所需要的優(yōu)勢,。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達(dá)40％左右。ThomasM,，etal（2005）研究數(shù)據(jù)表明,，去乙酰化的PEI40000（PolyethylenimineMAX40000）體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,，小鼠體內(nèi)靶向效率達(dá)到10000倍,，隨之肺部特異療效顯示增強(qiáng)1500倍。用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.上海電轉(zhuǎn)染試劑配制

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