基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,，其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),。pH值,，鈣離子濃度，DNA濃度,，沉淀時(shí)間,，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng),，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種,。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞,。此方法操作簡(jiǎn)單,，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,，但具有一定的細(xì)胞毒性,，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,，需要去除血清,。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡(jiǎn)介：

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑,，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾,，然后封裝于玻璃小瓶中,，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。

優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。

2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,，只需對(duì)X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育,，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。

3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作,。 pei轉(zhuǎn)染試劑原理每孔培養(yǎng)體積均為100μL,，細(xì)胞數(shù)目在105左右。

羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,，升級(jí)版的多組分混合試劑,，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,，尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn),。

兩種試劑對(duì)CHO-K1 細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,，B和D是明場(chǎng)顯微圖. 與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較,，X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性

不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENE HP 試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑

超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證

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X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑

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siRNA，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,，培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測(cè)基因沉默效果。這個(gè)快速操作流程簡(jiǎn)便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,，方便至極,。當(dāng)然，習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,，只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了,。沒(méi)有禁用血清、***的困擾,，HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化到了***,。適合多種細(xì)胞類(lèi)型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類(lèi)型，包括HeLa,、HeLaS3,、HEK293、NIH/3T3,、Huh-7,、HepG2,、MCF-7、HUVEC和NHLF等,。對(duì)于原代細(xì)胞,，產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞,、角質(zhì)細(xì)胞,、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟，貼心CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?

Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn),、高效的siRNA輸送解決方案,。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中（包括常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型、干細(xì)胞,、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型）提供如此簡(jiǎn)便,、高效的siRNA輸送效果。

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可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果

相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,，Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果,。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下，Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,，超過(guò)其他RNAi試劑,。 賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細(xì)胞類(lèi)型的轉(zhuǎn)染,。上海腺病毒轉(zhuǎn)染試劑配制

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