在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),,需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA,、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),。
我們提供了各種DNA,、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,,讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,,是因?yàn)楹怂岽嬖冢皇且驗(yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速,、簡便的實(shí)驗(yàn)方案
連續(xù)細(xì)胞系 具有無限增殖的潛能,,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,,它們?cè)谂囵B(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài),。
誰來拯救我的細(xì)胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑類型
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,,適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,,通過檢測GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率,。細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性,。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過其他RNAi試劑,。
胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要?。‘?dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,,沒有細(xì)微污染,,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦,!載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),,當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,,或污染別的質(zhì)粒,、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證,。
siRNA,,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,,培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測基因沉默效果,。這個(gè)快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,方便至極,。當(dāng)然,,習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了,。沒有禁用血清,、***的困擾,HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡化到了***,。適合多種細(xì)胞類型:HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型,,包括HeLa、HeLaS3,、HEK293,、NIH/3T3,、Huh-7,、HepG2,、MCF-7,、HUVEC和NHLF等,。對(duì)于原代細(xì)胞,,產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC,、成纖維細(xì)胞,、角質(zhì)細(xì)胞,、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟,,貼心將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,,前后移動(dòng)培養(yǎng)皿,混合均勻,;
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,,帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,,前者細(xì)胞毒性相對(duì)較大,后者細(xì)胞毒性較小,,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性,,可謂魚和熊掌不可兼得也,。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,,混合了不同 配方的脂類(非脂質(zhì)體),、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分,,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢,,且操作更加簡單,易于高通量,。3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異,。上海sirna轉(zhuǎn)染試劑作用
細(xì)胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑類型
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級(jí)版的多組分混合試劑,,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,,在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證,尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn),。圖1.兩種試劑對(duì)CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑類型
上海儒安生物科技有限公司一直專注于從事生物技術(shù),、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā),、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),,軟件開發(fā),,電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),,化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品,、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品,、易制毒化學(xué)品),、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售。,,是一家醫(yī)藥健康的企業(yè),,擁有自己**的技術(shù)體系。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),,是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力,。誠實(shí),、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則,。公司致力于打造***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體,。公司深耕細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體,正積蓄著更大的能量,,向更廣闊的空間,、更寬泛的領(lǐng)域拓展。