何謂熱滅活

一般是以56℃,，30分鐘來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E,，可以使補(bǔ)體去活化,，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮,，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化,。

有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅清,，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒(méi)有任何作用,，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)的增多,，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是 "小黑點(diǎn)",，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。

購(gòu)買的時(shí)候注意詢問(wèn)廠家是否是已滅***清。 常期存放請(qǐng)將血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中凍存,有效期5年,。廣州進(jìn)口血清 廠家

有研究人員通過(guò)不同年齡段的牛血清在不同濃度下對(duì)SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn),，用較大增殖濃度、倍增時(shí)間,、克隆率等指標(biāo)來(lái)推斷樣品血清的**年齡段,，其結(jié)果如下：SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先,，研究人員在無(wú)菌條件下,，將7個(gè)供試血清μm過(guò)濾除菌，然后將供試血清按10％,、8％,、6％,、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104／ml,。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種,，每個(gè)試驗(yàn)樣接種8孔。每24h記數(shù)一孔,，共記數(shù)7d,。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中，將SP2／0細(xì)胞稀釋到5個(gè)／mL,，分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,，每孔，每個(gè)供試血清樣品接種48孔,。杭州山羊血清所制備的免疫血清與人紅細(xì)胞內(nèi)醛縮酶無(wú)交叉反應(yīng),。

血清定義指纖維蛋白原已被除去的血漿用法肌肉或靜脈注射外文名Serum作用提供和各種生長(zhǎng)因子等形態(tài)淡黃色透明液體

血清的成份可能有幾百種之多，對(duì)其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),，這給研究工作帶來(lái)許多困難,；

第二:血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大,，而且血清保存期至多一年,，因此，要保證每批血清的相似性極為困難,，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制,；

第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì)，這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一,。

抗體稀釋參考

一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL,，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL

  注意事項(xiàng)  1.使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析;

  2. 工作液在室溫下8小時(shí)內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽(yáng)光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實(shí)驗(yàn)室照明強(qiáng)度不會(huì)破壞工作液的穩(wěn)定性;

  3. 封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào),。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng);

  4. 使用親和素/生物素檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕Ｄ讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物素,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào);

  5. 保證洗滌緩沖液,、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干,。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào);

血清能提供促接觸和伸展因子，使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,，對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用.

解凍血清時(shí),，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生請(qǐng)勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無(wú)須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過(guò)高,，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多,。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心,，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜,。如需購(gòu)買血清，歡迎咨詢上海儒安,。gemini血清進(jìn)口

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血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知,，但還有一部分尚不清楚,，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡,、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異,。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度,、滲透壓等作用,。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白、α1,、α2,、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長(zhǎng)因子,、***、無(wú)機(jī)物等,，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或***生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的,。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但仍存在一些問(wèn)題,。廣州進(jìn)口血清 廠家

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