LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,，適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,，通過檢測(cè)GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,，通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,，適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染,。陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑作用

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,，左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,，右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍,。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性.DNA轉(zhuǎn)染試劑多少錢在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。

在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%,。2.高靈活應(yīng)用,，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn),。3.細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好,，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo),。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基),。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn),。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),。pH值，鈣離子濃度,，DNA濃度,，沉淀時(shí)間,，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響,，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長,，且重復(fù)性不佳,?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種,。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡單,，重復(fù)性好,，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細(xì)胞毒性,，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,，需要去除血清,。pei轉(zhuǎn)染試劑說明書是什么?

基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種,。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞,。此方法操作簡單,，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,，但具有一定的細(xì)胞毒性,，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,，需要去除血清。一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照,，對(duì)RNAi結(jié)果進(jìn)行比較,。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA，達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng),。上海病毒轉(zhuǎn)染試劑報(bào)價(jià)

無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,。陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑作用

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系）,，且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對(duì)來說，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑作用

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