簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑,，無動物源性成分,，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。3.使用細胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,，導(dǎo)致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)).賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,，適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。上海原代細胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

轉(zhuǎn)染48小時后,，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像（左側(cè)四幅圖）,，A：LipoD293；B：293fectin,；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離,。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色（右上圖E），道1為LipoD293293,、道2為標(biāo)準蛋白分子,、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量（見右下圖F）,。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細胞,。一個GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度,。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）,。細胞轉(zhuǎn)染試劑選購采用siRNA轉(zhuǎn)染試劑可以將siRNA輕松導(dǎo)入細胞內(nèi),。

對CHO細胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細胞。在轉(zhuǎn)染24小時后,，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測器測定,；GFP陽性細胞率使用BD公司的FACS檢測。左圖：LipoD293試劑（升級版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的價格比較（美元/1000微升）,。所有的價格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對CHO細胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒

確定希望輸送的運載物（如DNA,、RNA或蛋白質(zhì)）根據(jù)不同實驗類型，我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內(nèi)部,，包括**常見的DNA,，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達蛋白的mRNA,，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染,。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。2希望轉(zhuǎn)染的細胞類型轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,，連續(xù)細胞系和原代細胞,。連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理,。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.

在難轉(zhuǎn)染細胞（原代大鼠動脈平滑肌細胞）轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護理系的NickolaiDulin博士友情提供制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用LipoD293?試劑（左圖）和Lipofecatmine2000（L2K,右圖）分別將GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細胞,。轉(zhuǎn)染24小時后,，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率,。對難轉(zhuǎn)染細胞LNCap細胞轉(zhuǎn)染效率的比較在難轉(zhuǎn)染細胞（原代大鼠動脈平滑肌細胞）轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由羅斯威爾公園**研究所（RoswellCancerInstitute）試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。細胞轉(zhuǎn)染試劑選購

轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細胞中的過程,，是細胞生物學(xué),、基因表達和基因***實驗中的關(guān)鍵步驟。上海原代細胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1,，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實驗步驟進行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后,，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下,，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合,。轉(zhuǎn)染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率,。上海原代細胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

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