上海儒安生物科技有限公司封閉液貨號:R52-412A規(guī)格:500ml價格/元:120產(chǎn)品簡介:Western封閉液,,可以用于Western時轉(zhuǎn)移后的蛋白樣品的PVDF膜或NC膜的封閉,。封閉后,可以減小后續(xù)的一抗或二抗和膜的非特異性結(jié)合,,降低背景,,增強(qiáng)信噪比,。按照每張膜封閉需要5-10毫升封閉液計算,一個包裝的Western封閉液可以封閉10-20張膜,。產(chǎn)品說明完成轉(zhuǎn)膜后,,用Western洗滌液洗滌蛋白膜1-2分鐘。加入Western封閉液,,封閉60分鐘,,然后進(jìn)行一抗孵育等后續(xù)操作。CCK-8的檢測操作更簡單,,無需有機(jī)溶劑.成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測
內(nèi)參抗體
Anti MBP-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡介
麥芽糖結(jié)合蛋白(Maltose binding protein, MBP)是非常有用的親和標(biāo)簽,,可提高M(jìn)BP標(biāo)簽融合蛋白的表達(dá)量和可溶性。它能促進(jìn)融合蛋白的正確折疊,,也能阻止不溶性蛋白(包涵體)的形成,。本抗體可用于MBP標(biāo)簽融合蛋白的檢測。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?用于WB實(shí)驗(yàn),,性價比高,,推薦稀釋比例為1:1000 - 1:10000
?常備現(xiàn)貨Anti GST-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡介
Anti GST-tag mouse mAb是常用的標(biāo)簽抗體。本抗體可在純化及將具有高度敏感性,,可用于GST標(biāo)簽融合蛋白的檢測,,能識別重組蛋白C端、N端和內(nèi)部的GST標(biāo)簽,。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?用于WB實(shí)驗(yàn),,性價比高,推薦稀釋比例為1:1000 - 1:10000
?常備現(xiàn)貨 血管平滑肌細(xì)胞增殖試劑盒細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖,。
Q:在做刺激實(shí)驗(yàn)時,對測定是否有影響,?
A:如果有還原性,,則會與CCK-8發(fā)生反應(yīng),,影響吸光度;金屬離子的存在可能會影響CCK-8的靈敏度,。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛,、氯化鐵、硫酸銅會5% ,、15% ,、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降低,。如果終濃度是10 mM 的話,。
Q:如果吸光度值太低,可以采取什么辦法,?
A:適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長加入CCK-8溶液后的孵育時間,。
Q:如果吸光度值太高,可以采取什么辦法,?
A:適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量(建議正式實(shí)驗(yàn)前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系)或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時間,。
Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,,為MTT法的替代方法,,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,,美國,,歐洲等國家地區(qū)均持有**,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國獲得了WST-8的注冊商標(biāo),。
CCK-8法與普通的MTT法相比,,具有特點(diǎn):
★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,,重現(xiàn)性好
★操作簡便,,省時省力
★水溶性,不需要換液,,尤其適合于懸浮細(xì)胞
★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低
★為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,,即開即用
★適合于高通量篩選
CCK-8用途:篩選、細(xì)胞增殖測定,、細(xì)胞毒性測定,、藥敏試驗(yàn)
CCK-8試劑盒在國內(nèi)**科研院所、重點(diǎn)大學(xué),、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,,國際認(rèn)可度高,,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,,比較高IF26.5分,。 機(jī)體創(chuàng)傷愈合、組織再生,、病理組織修復(fù)等,,都要依賴細(xì) 胞增殖。
Cell Counting Kit-8(cck8)細(xì)胞增值與毒性檢測試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測試劑盒,。它在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan)。甲臜的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。細(xì)胞增殖越快,、細(xì)胞毒性越小、細(xì)胞數(shù)量越多,,則顏色越深,,顏色的深淺與細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。該產(chǎn)品細(xì)胞毒性小,,對后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒有影響,,與MTT,XTT,,MTS和WST-1相比,,此法檢測靈敏度更高,線性范圍更寬,,適用于***篩選,,細(xì)胞增殖測定,細(xì)胞毒性測定和**藥敏實(shí)驗(yàn),。 CCK-8是非放射性的,,允許敏感的比色分析來測定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性分析中的活細(xì)胞數(shù)量。
比MTT,、MTS或WST-1更敏感對細(xì)胞無毒性簡單步驟(無需解凍) ,,操作更安全。 細(xì)胞分裂的前期,,明顯的變化是細(xì)胞核中出現(xiàn)染色體,。武漢mts檢測細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖的技術(shù)難點(diǎn)。成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測
檢測波長450-490nm,,參比波長600-650nm,。實(shí)驗(yàn)二:細(xì)胞毒性分析1、制備細(xì)胞懸液:細(xì)胞計數(shù)2,、接種到96孔板中:根據(jù)合適的鋪板細(xì)胞數(shù),,每孔約100ul細(xì)胞懸液,,同樣的樣本可做3個重復(fù)。3,、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):細(xì)胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)2-4小時,,如果不需要貼壁,這步可以省去,。4,、加入不同濃度的毒性物質(zhì)5、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng):加入毒性物質(zhì)的培養(yǎng)時間,,要看毒性物質(zhì)的性質(zhì)和細(xì)胞的敏感性,,一般要根據(jù)細(xì)胞周期來決定,起碼要一代以上的時間,。6,、加入10ulCCK8:由于每孔加入CCK8量比較少,有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差,,建議在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻,。7、培養(yǎng)1-4小時:細(xì)胞種類不同,,形成的Formazan的量也不一樣,。如果顯色不夠的話,可以繼續(xù)培養(yǎng),,以確認(rèn)比較好條件,。特別是血液細(xì)胞形成的Formazan很少,需要較長的顯色時間(5-6小時),。8,、測定450nm吸光度:建議采用雙波長進(jìn)行測定,檢測波長450-490nm,,參比波長600-650nm,。注:若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10μLw/vSDS溶液,,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下,。24小時內(nèi)測定,吸光度不會發(fā)生變化,。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,,可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基。成都心臟成纖維細(xì)胞增殖檢測
上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號2幢J1718室,,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),,以誠信,、敬業(yè),、進(jìn)取為宗旨,以建上海儒安生物產(chǎn)品為目標(biāo),,努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè),。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,,將從事生物技術(shù),、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā),、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),,軟件開發(fā),,電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),,化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品,、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品,、易制毒化學(xué)品),、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售。等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底,。自公司成立以來,,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營理念,,始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn),,為客戶提供良好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體,從而使公司不斷發(fā)展壯大,。