LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,,共1.0微克)共轉(zhuǎn)染(6孔板中每孔的量),,并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,,以此來評價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下,,HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合,。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率,。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,,適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染。上海懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性,。上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑類型一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對照,,對RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA,,達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng),。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便,、節(jié)省時(shí)間,,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便,、節(jié)省時(shí)間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,,前后移動(dòng)培養(yǎng)皿,混合均勻,;
將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(3105)接種至6孔板中,,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(DP3321,、DP7857)中,,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER,、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,,DP7857中的siBMPER,、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21%,、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物,。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,,與原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1,、p-SYK、SYK,、CARD9,、p-p65和NLRP3的上調(diào)。RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn),、高效的siRNA輸送解決方案,。上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑多少錢
轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.上海懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便,、節(jié)省時(shí)間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作,。上海懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
上海儒安生物科技有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才,,集企業(yè)奇思,創(chuàng)經(jīng)濟(jì)奇跡,,一群有夢想有朝氣的團(tuán)隊(duì)不斷在前進(jìn)的道路上開創(chuàng)新天地,,繪畫新藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的信譽(yù),,信奉著“爭取每一個(gè)客戶不容易,,失去每一個(gè)用戶很簡單”的理念,市場是企業(yè)的方向,,質(zhì)量是企業(yè)的生命,,在公司有效方針的領(lǐng)導(dǎo)下,全體上下,,團(tuán)結(jié)一致,,共同進(jìn)退,,**協(xié)力把各方面工作做得更好,努力開創(chuàng)工作的新局面,,公司的新高度,,未來上海儒安生物科技供應(yīng)和您一起奔向更美好的未來,即使現(xiàn)在有一點(diǎn)小小的成績,,也不足以驕傲,,過去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗(yàn),才能繼續(xù)上路,,讓我們一起點(diǎn)燃新的希望,,放飛新的夢想!