在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞（原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞）轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的NickolaiDulin博士友情提供制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用LipoD293?試劑（左圖）和Lipofecatmine2000（L2K,右圖）分別將GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞,。轉(zhuǎn)染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,，以此來評價轉(zhuǎn)染效率,。對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞LNCap細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由羅斯威爾公園**研究所（RoswellCancerInstitute）的LynGao博士友情提供賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染,。上海病毒轉(zhuǎn)染試劑推薦

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中**常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi),。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染,，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體,，以慢***,、腺***和腺相關(guān)***等**常見，其侵染效率可以達(dá)到90%以上,，但常因安全性等問題,，很多實驗室對其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因***,，無論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法,，主要包括兩類：陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物,。其基本原理是利用陽離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過正負(fù)電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。上海蛋白轉(zhuǎn)染試劑盒臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..

轉(zhuǎn)染48小時后,，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖）,，A：LipoD293；B：293fectin,；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離,。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍(lán)染色（右上圖E），道1為LipoD293293,、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子,、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6,。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見右下圖F）,。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個GFP載體,，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度,。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液,，1微升（上圖）和10微升（下圖）,。

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時后,，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）,。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin,、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),，用量為LipoD293?試劑，20微克,，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA,。轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成； 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,，直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面,，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),。pH值，鈣離子濃度,，DNA濃度,，沉淀時間，細(xì)胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種,。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞,。此方法操作簡單,，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,，但具有一定的細(xì)胞毒性,，可能會干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,，需要去除血清,。mRNA細(xì)胞&***轉(zhuǎn)染試劑來助力.上海細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑價格

連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理.上海病毒轉(zhuǎn)染試劑推薦

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