超級好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶：HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,，這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染（推薦濃度是1nM-5nM）,。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應(yīng)，正是這一產(chǎn)品的精髓所在,。除了siRNA,，HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染，滿足miRNA功能分析的需要,。操作簡單,，方便快速：HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的，甚至***之內(nèi)可以完成再次接種,、轉(zhuǎn)染到檢測結(jié)果,！這對于高通量反應(yīng)簡直是求之不得的福音：轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,，在37度培養(yǎng)箱中保溫,。研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA,、mimic,、inhibitor,、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),。pH值,，鈣離子濃度,，DNA濃度,，沉淀時間，細(xì)胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響,，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種,。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞,。此方法操作簡單,，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,，但具有一定的細(xì)胞毒性,，可能會干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,，需要去除血清,。上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑原理世界上低價的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2μm濾膜過濾,，然后封裝于玻璃小瓶中,，適用于細(xì)胞分析的多種實驗,。優(yōu)勢：1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便、節(jié)省時間,，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費時費力

在選擇轉(zhuǎn)染方法時,，需考慮您希望輸送的運載物（DNA、RNA或蛋白質(zhì)）以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型,。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),。我們提供了各種DNA、siRNA,、寡核苷酸和RNA輸送選擇,，讓您可以對自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果，是因為核酸存在,，而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速,、簡便的實驗方案連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理,。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。無論有無血清,、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,。

簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分,，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,，對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率,。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好,。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能,。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP,，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))。轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成,； 混勻后室溫下孵育15-20分鐘,，直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑原理

用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（3105）接種至6孔板中，然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER,、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（DP3321,、DP7857）中，48h后,，qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32％,、49.71％和43.64％,，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21％,、47.46％和46.31％,。將1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM（siRNA濃度：50nM）中,，與原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)48h,。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1,、p-SYK,、SYK、CARD9,、p-p65和NLRP3的上調(diào),。常用轉(zhuǎn)染試劑推薦

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