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上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

來源: 發(fā)布時間:2023-02-23

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率,。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。用于基因編輯的RNP轉(zhuǎn)染試劑.上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,,粘附到細胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì),。pH值,,鈣離子濃度,,DNA濃度,沉淀時間,,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響,,因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,且重復(fù)性不佳,?;谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,,而是帶負電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,,經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細胞,。此方法操作簡單,重復(fù)性好,,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,,但具有一定的細胞毒性,,可能會干擾細胞的代謝,。且活性受血清影響,需要去除血清,。上海常用轉(zhuǎn)染試劑梯度MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),,且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA,、mimic,、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑,。

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,。因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似,。但相對于連續(xù)細胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。質(zhì)粒細胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑多少錢

正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步,。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

將膠質(zhì)瘤干細胞(3105)接種至6孔板中,,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進膠質(zhì)瘤干細胞(DP3321,、DP7857)中,,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER,、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,,DP7857中的siBMPER,、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%,。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物,。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,,與原代小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1,、p-SYK、SYK,、CARD9,、p-p65和NLRP3的上調(diào)。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

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