基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi),。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞,。此方法操作簡單，重復(fù)性好,，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,，但具有一定的細(xì)胞毒性，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝,。且活性受血清影響,，需要去除血清。一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對照,，對RNAi結(jié)果進(jìn)行比較,。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA，達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng),。上海轉(zhuǎn)染試劑作用

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）,。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑,、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),，用量為LipoD293?試劑,，20微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA,。上海羅氏轉(zhuǎn)染試劑對照RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn),、高效的siRNA輸送解決方案。

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：高轉(zhuǎn)染效率,，適用于多種細(xì)胞系對細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基1轉(zhuǎn)染效率高,，適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系，通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率,。2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性,。

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象,。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測）,。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng),。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5,、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射,。在第2,、5、9,、16,、23及30日收集血清，并使用顯色法對血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果,。低毒性我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入原代細(xì)胞,，那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??！當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒有細(xì)微污染,，鋪板均勻,。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng),、四質(zhì)粒系統(tǒng),，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng),！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,，且建議每次包裝都如此操作,，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng),，并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證.驚艷登場!臨床級載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑,。上海轉(zhuǎn)染試劑作用

連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理,。上海轉(zhuǎn)染試劑作用

轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少：轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程,，是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟,。不同的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)差別巨大,，我們可以利用化學(xué)方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細(xì)胞內(nèi)，也可以使用電穿孔方法利用電流在細(xì)胞膜上開孔,，使核酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染,。如何選擇**受信賴的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng),，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要影響因素。上海轉(zhuǎn)染試劑作用

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