確定希望輸送的運(yùn)載物

（如DNA,、RNA或蛋白質(zhì)）

根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型,，我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,，包括**常見(jiàn)的DNA，用于基因編輯的siRNA,，能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步,。

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希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型

轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡(jiǎn)單分為兩大類,，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理,。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力，它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài),。 轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過(guò)程,，是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟,。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系）,，且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。湖北原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.

siRNA,，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,，培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測(cè)基因沉默效果,。這個(gè)快速操作流程簡(jiǎn)便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,，方便至極,。當(dāng)然，習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,，只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了,。沒(méi)有禁用血清、***的困擾,，HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化到了***,。適合多種細(xì)胞類型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型，包括HeLa,、HeLaS3,、HEK293、NIH/3T3,、Huh-7,、HepG2、MCF-7,、HUVEC和NHLF等,。對(duì)于原代細(xì)胞，產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC,、成纖維細(xì)胞,、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟,，貼心

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%,。

2.高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn),。

3.細(xì)胞毒性低,，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo),。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn),。根據(jù)各試劑說(shuō)明書建議的操作流程,，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,。 通過(guò)LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率,。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。 MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡(jiǎn)介：

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾,，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。

優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。

2.操作簡(jiǎn)便,、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,，再與質(zhì)粒DNA共同孵育,，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。

3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作,。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。廣東roche 轉(zhuǎn)染試劑

包括常見(jiàn)細(xì)胞類型,、干細(xì)胞,、原代細(xì)胞以及歷來(lái)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型）提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果,。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,，RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能,、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場(chǎng)上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目,，各有千秋,，然而沒(méi)有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細(xì)胞種類、滿足所有實(shí)驗(yàn)需求和目的,，成分控認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機(jī)理對(duì)轉(zhuǎn)染效果及細(xì)胞生理作用影響***,，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時(shí)要留意成分哦,。嚴(yán)格來(lái)講,，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法（電穿孔,、顯微注射等）以及***介導(dǎo)法,，沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染,。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

上海儒安生物科技有限公司擁有從事生物技術(shù),、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā),、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),，軟件開(kāi)發(fā),，電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),，化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品,、監(jiān)控化學(xué)品,、民用物品,、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售,。等多項(xiàng)業(yè)務(wù),，主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液,，cck8細(xì)胞增殖,，內(nèi)參抗體。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),，是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。公司以誠(chéng)信為本,，業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖,，內(nèi)參抗體,，我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé)，對(duì)員工負(fù)責(zé),，更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,，爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量,、飽滿的工作態(tài)度,、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,，樹(shù)立了良好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體形象,，贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可,。