在選擇轉(zhuǎn)染方法時,,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細胞類型,。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),。我們提供了各種DNA、siRNA,、寡核苷酸和RNA輸送選擇,,讓您可以對自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因為核酸存在,,而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細胞類型提供了快速,、簡便的實驗方案連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理,。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。轉(zhuǎn)染試劑快速查找工具上線!上海質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑配制
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默,。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍,。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。慢病毒轉(zhuǎn)染試劑類型從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。
圖3.用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min),、稀釋,、及注射即可。高效,、靶向敲低在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果圖4.使用Invivofectamine3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低,。Invivofectamine3.0試劑與靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA組成的復合物,,以每千克小鼠體重1mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估),。
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系,。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定,。2.高轉(zhuǎn)染效率,,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,,結(jié)果相關(guān)性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1,。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞,。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)).轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,,連續(xù)細胞系和原代細胞.
LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉(zhuǎn)染(6孔板中每孔的量),,并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,,以此來評價轉(zhuǎn)染效率,。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合,。轉(zhuǎn)染48小時后,,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步,。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑多少錢
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原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),,且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。上海質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑配制
上海儒安生物科技有限公司在細胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,,內(nèi)參抗體一直在同行業(yè)中處于較強地位,,無論是產(chǎn)品還是服務,其高水平的能力始終貫穿于其中,。公司始建于2016-09-20,,在全國各個地區(qū)建立了良好的商貿(mào)渠道和技術(shù)協(xié)作關(guān)系。上海儒安生物科技致力于構(gòu)建醫(yī)藥健康自主創(chuàng)新的競爭力,,產(chǎn)品已銷往多個國家和地區(qū),,被國內(nèi)外眾多企業(yè)和客戶所認可。